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在伤口修复中,成纤维细胞具有成细胞外基质、刺激伤口收缩、诱导血管生成的功能。直接移植成纤维细胞由于创面缺损大、需要大量细胞且无载体情况下容易损失,难以重建受损组织。为了克服这一局限性,水凝胶作为细胞载体成为选择之一。将细胞与水凝胶前体溶液混合,凝胶化后大量细胞均匀地负载在凝胶内。负载的细胞可在三维(3D)水凝胶中有效存活和增殖,用于皮肤的修复。寻找合适的水凝胶材料成为生物材料研究的热点。琼脂糖具有无免疫原性、温敏成胶的优点,但存在细胞粘附性低和难降解的缺点,常使用具有生物活性或加快其降解的材料进行改性。明胶具有良好的生物活性和降解性能,在生物材料领域应用广泛。但其在37℃下不能成胶,往往使用化学交联成胶,因而需要寻求一种生物相容性更好的成胶方法。本研究拟采用降解琼脂糖接枝明胶制备一种结合两者的优点,能体温下凝胶化并能有效负载细胞的水凝胶。采用CDI(N,N-羰基二咪唑)与降解琼脂糖上的羟基偶联,然后与明胶上的胺基发生反应,得到琼脂糖-明胶接枝物,并可形成温敏水凝胶。研究了水凝胶的理化性质和细胞毒性、细胞粘附性和降解性。将成纤维细胞包埋在水凝胶中,通过活/死细胞染色研究其生长状况。最后将水凝胶负载成纤维细胞作为皮肤敷料研究其促进皮肤修复的性能,结果如下:改变CDI浓度和反应条件,得到接枝率分别为12.7%、40.3%、86.3%的琼脂糖-明胶接枝物,命名为C1、C2、C3。通过流变仪表征降解琼脂糖和C1、C2、C3的成胶时间分别为100 s、110 s、120 s、180 s,凝胶模量分别为850 Pa、1450Pa、1130 Pa、716 Pa,成胶温度都在40℃左右。将材料植入大鼠皮下,发现C3的降解效果比琼脂糖好且有血管等组织长入水凝胶。通过细胞毒性、细胞黏附实验,证明该水凝胶无毒,具有良好的细胞黏附性。将成纤维细胞包封在水凝胶中,培养3w后在C3中细胞活力仍达到93.22%,表明该水凝胶为细胞的三维生长提供了良好的环境。将C3水凝胶负载成纤维细胞后作为皮肤敷料研究其促进皮肤修复的性能,发现负载成纤维细胞的琼脂糖-明胶接枝物水凝胶对小鼠皮肤缺损修复的效果比PBS和纯琼脂糖-明胶接枝物水凝胶更好。研究表明琼脂糖-明胶接枝物水凝胶生物相容性良好,能支持成纤维细胞3D培养,负载细胞后能促进皮肤缺损的修复,是一种应用前景广阔的生物材料。