健脾消癌方通过lncRNA PANDAR对人结肠癌细胞增殖、迁移行为的影响

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuezhenlong0310
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目的:验证lnc RNA PANDAR对人结肠癌细胞的增殖能力、迁移能力的影响;初步探讨健脾消癌方是否通过调控lnc RNA PANDAR影响人结肠癌细胞增殖和迁移能力。方法:RT-PCR检验人结肠癌细胞HCT116、SW620、SW480与人正常结肠上皮细胞NCM460中lnc RNA PANDAR的表达水平。无药血清、健脾消癌方含药血清进行干预,将HCT116细胞分为10%无药血清组、15%无药血清组、20%无药血清组、10%含药血清组、15%含药血清组、20%含药血清组,干预24小时后RT-PCR检验各组基因表达量,选择阳性含药血清组进行后续实验。使用质粒转染技术及健脾消癌方含药血清干预分为sh PANDAR组(沉默组)、N-sh PANDAR组(沉默对照组)、pc PANDAR组(过表达组)、N-pc PANDAR组(过表达对照组)、pc PANDAR-JPXAF组(过表达-15%健脾消癌方含药血清组)、JPXAF组(15%健脾消癌方含药血清组)、N组(15%无药血清组/空白对照组/未转染组),干预后RT-PCR检验基因表达水平、CCK-8检验各组细胞增殖情况、细胞划痕实验检验细胞迁移能力情况。结果:1、人结肠癌细胞SW620、HCT116、SW480中lnc RNA PANDAR基因表达水平高于人正常结肠上皮细胞NCM460。2、10%、15%、20%三组无药血清组中lnc RNA PANDAR基因表达水平差异无统计学意义。15%含药血清组及20%含药血清组中lnc RNA PANDAR基因表达水平较15%无药血清组及20%无药血清组下调。3、沉默lnc RNA PANDAR 24小时后,HCT116细胞增殖速度减慢。过表达lnc RNA PANDAR 24小时后,HCT116细胞增殖速度加快。与空白对照组相比,JPXAF组及pc PANDAR-JPXAF组增殖速度减慢。sh PANDAR组、JPXAF组、pc PANDAR-JPXAF组细胞增殖状况相当。4、沉默lnc RNA PANDAR 36小时后,细胞迁移能力显著下降。过表达lnc RNA PANDAR 24小时后,细胞迁移能力提高。12小时左右N组细胞迁移能力较pc PANDAR组、JPXAF组、pc PANDAR-JPXAF组稍高,差异不具统计学意义。24小时后JPXAF组细胞迁移能力均较N组下降,36小时后pc PANDAR-JPXAF组细胞迁移能力较N组下降;24小时后pc PANDAR组细胞迁移能力较N组明显提高。结论:1、人结肠癌细胞lnc RNA PANDAR表达水平高于人正常结肠上皮细胞;lnc RNA PANDAR能促进肠癌细胞增殖、迁移能力。2、健脾消癌方通过调控lnc RNA PANDAR抑制人结肠癌细胞增殖、迁移能力。
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