针刺抑制MMP-2、MMP-9及炎性因子对大鼠脑梗死溶栓时间窗的影响

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:titanium2002
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目的:观察针刺对改良的自体血栓栓塞脑梗死模型大鼠溶栓后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性及相关炎性因子白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间粘附分子-1 (ICAM-1)的mRNA的表达影响,探讨针刺对延长脑梗死溶栓时间窗的作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、单纯溶栓组、针刺联合溶栓组、药物联合溶栓组,其中单纯溶栓组、针刺联合溶栓组、药物联合溶栓组分为缺血后6h、9h溶栓2个亚组,尿激酶(UK)为溶栓药物,针刺联合溶栓组在造模成功后2h针刺治疗,采用“醒脑开窍”针刺法,药物联合溶栓组在造模成功后2h予基质金属蛋白酶抑制剂强力霉素治疗。采用改良的自体血栓栓塞法制备脑梗死模型,根据Bederson法进行神经功能评分,判断造模是否成功,24h后断头取脑,运用TTC染色法观察各组大鼠脑梗死体积,运用Real-time PCR法测定相关炎性因子IL-1、TNF-α、ICAM-1的mRNA表达,运用明胶酶谱法测定各组大鼠脑梗死区域MMP-2、 MMP-9的活性。结果:(1)脑梗死体积百分比:与模型组比较,单纯溶栓9h组对脑梗死体积改善不明显,差异无统计学意义(P>0.05),单纯溶栓6h组、针刺联合溶栓6h、9h组、药物联合溶栓6h、9h组溶栓后脑梗死体积百分比明显低于模型组,具有显著统计学意义(P<0.01);针刺联合溶栓组作用优于单纯溶栓组,具有显著统计学意义(P<0.01);针刺联合溶栓组作用优于药物联合溶栓组,具有统计学意义(P<0.05)。(2) IL-1、TNF-α 、ICAM-1的mRNA的表达:与模型组比较,单纯溶栓9h组IL-1、 TNF-α、ICAM-1的mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05),单纯溶栓6h组、针刺联合溶栓6h、9h组、药物联合溶栓6h、9h组均能下调IL-1、TNF-α、ICAM-1的mRNA表达量,均具有显著统计学意义(P<0.01);与针刺联合溶栓组比较,针刺联合溶栓组下调作用强于单纯溶栓组,具有显著统计学意义(P<0.01),且针刺联合溶栓组下调作用强于药物联合溶栓组,具有统计学意义(P<0.05)。(3)MMP-2的活性表达:与模型组比较,单纯溶栓9h组MMP-2的活性表达量差异无统计学意义(P>0.05),单纯溶栓6h组、针刺联合溶栓6h、9h组、药物联合溶栓6h、9h组均能抑制MMP-2活性表达,差异均具有显著统计学意义(P<0.01);与针刺联合溶栓6h组比较,针刺联合溶栓6h组抑制MMP-2作用强于单纯溶栓6h组及药物联合溶栓6h组,差异具有统计学意义(P<0.05);与针刺联合溶栓9h组比较,针刺联合溶栓9h组抑制MMP-2作用强于单纯溶栓9h组,差异具有显著统计学意义(P<0.01),且抑制作用强于药物联合溶栓9h组,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)MMP-9的活性表达:与模型组比较,单纯溶栓9h组MMP-9的活性表达量差异无统计学意义(P>0.05),单纯溶栓6h组、针刺联合溶栓6h、9h组、药物联合溶栓6h、9h组均能抑制MMP-9活性表达,均具有显著统计学意义(P<0.01);与针刺联合溶栓组比较,针刺联合溶栓组抑制MMP-9作用强于单纯溶栓组,具有显著统计学意义(P<0.01),且针刺联合溶栓组抑制作用强于药物联合溶栓组,具有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺能够减小溶栓后脑梗死体积,下调相关炎性因子IL-1、TNF-α、ICAM-1的mRNA的表达量,抑制MMP-2、MMP-9的活性,且较单纯溶栓治疗及基质金属蛋白酶抑制剂干预后溶栓治疗作用更为显著,对延长脑梗死溶栓时间窗有积极的影响,对进一步指导临床具有重大意义。
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