骨桥蛋白(OPN)反义基因在乳腺癌浸润与转移中的作用研究

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乳腺癌是我国常见的恶性肿瘤之一,常用的手术、化疗、放疗等传统的治疗方式均未能使其疗效得到明显的提高。自九十年代以来,肿瘤基因治疗已成为最引人瞩目的研究领域,是继手术、放疗、化疗、免疫治疗之后的第5种模式。骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是在骨基质中发现的一种富含唾液酸的磷酸化糖蛋白,在人体组织中分布广泛,且具有多种功能。近年来,OPN与肿瘤转移的关系日益引起人们的关注,已被广泛公认为是肿瘤转移相关基因(metastasis-associated gene)或称转移基因(metastasis gene)。本研究通过构建人骨桥蛋白反义基因真核表达质粒pcDNA3.1-ANOPN,脂质体介导转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,经G418筛选获得稳定表达ANOPN基因的转染细胞MDA-ANOPN,在体外探讨了ANOPN基因对乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,在生长速度、倍增时间、黏附、侵袭及迁移能力等方面的变化。建立了乳腺癌细胞系MDA-ANOPN、MDA-vect、MDA细胞的裸鼠人工荷瘤动物模型,在体内探讨了ANOPN基因在体内对MDA-MB-231细胞的作用,通过观察ANOPN基因对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞在裸鼠体内出瘤时间、肿瘤生长速度、肿瘤微血管密度、肺转移灶的数量等指标,对OPN基因表达量与MDA-MB-231细胞生物学表现之间的关系的研究,探讨了OPN基因在乳腺癌发生、发展、浸润以及转移中的作用。OPN基因表达量的降低能够抑制乳腺癌细胞的恶性表型,降低其对裸鼠的致瘤性和转移性,说明OPN基因在乳腺癌基因治疗中的重要意义,为其临床应用提供了理论和实验依据。
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