1型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus, HSV1)是疱疹病毒科α病毒亚科的一员,能引起多种疾病,包括龈口炎,病毒性脑炎,角膜结膜炎等,能够感染多种细胞并在体内感染中建立潜伏感染。针对HSV感染目前还没有疫苗和完全清除体内病毒的药物被研发出来。此外,HSV由于其具有大型环状DNA和神经潜伏感染的特征,在研究神经系统疾病时可以作为载体而得到广泛的应用。本研究中从临床病人口唇部疱液分离得到一株病毒,通过Vero细胞扩增纯化,通过PCR分析、电镜鉴定确定该病毒为1型HSV,命名为HSV1-ZW6,对其进行病毒增值特性分析,包括对其感染不同细胞病变形态学分析、一步生长曲线的绘制、小鼠神经毒力检测试验等,结果提示此分离株与实验室传代毒株HSV1-8F相比,其神经毒力略高于HSV1-8F。利用高通量测序技术对此株病毒基因组进行了测序,联合Sanger测序对其进行修补,最终获得了150290bp的病毒全基因组序列,并通过对全基因进行基因预测和注释获得其全基因组结构图,选取部分基因进行亲缘关系进化树绘制和简单重复序列分析,发现位于IRL/TRL区的一段32个A/T重复的特征序列。根据已知序列,利用CRISPR-Cas9技术快速获得了一株带有绿色荧光蛋白的重组病毒ZW6-EGFP。此外,本研究在建立了二倍体细胞KMB17细胞代次与端粒长度变化模型的基础上,在细胞水平检测了单纯疱疹病毒感染KMB17细胞后,对感染后端粒长度的影响,初步发现HSV1感染KMB17细胞后会对其产生影响,而感染癌细胞或永生化细胞系则未发现相似结果。通过对HSVl的分离、鉴定及全基因组测序完成,本研究建立了一株新的HSV1参考株及其相应的报告病毒,利用该病毒研究病毒与细胞之间的相互作用进行了初步探索,更多的生物特性还有待进一步的深入研究。