Survivin蛋白表达与上皮间质转化在胃癌中的关系研究

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目的:通过收集临床组织标本及临床病理资料,运用免疫组化方法测定胃癌组织中survivin与上皮间质转化标志蛋白表达情况,探究两者之间的关系;通过运用细胞培养、质粒转染、RT-q PCR、Western blot等技术,探究胃癌细胞株中,survivin与上皮间质转化标志蛋白表达情况及信号通路机制。方法:1)选取行根治手术的胃癌患者55例,于吉林大学第一医院病理科组织标本库,找到患者对应的标本蜡块,应用免疫组织化学方法,测定survivin蛋白、上皮间质转化标志蛋白(E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白)的表达情况。将E-钙黏蛋白阴性表达、N-钙黏蛋白阳性表达定义为发生了上皮间质转化,否则未发生上皮间转化;运用SPSS 24.0分析相关性。2)选择人胃癌细胞系SGC-7901为研究对象,实验共设置5组,具体如下:空白对照组(空白组),干扰survivin表达的实验组和对照组(si-Survivin组、si-NC组),慢病毒介导survivin过表达的实验组和对照组(Lv-NC组、Lv-Survivin组),采用si-RNA抑制survivin表达以及慢病毒转染使survivin过表达,RT-q PCR和Western blot检测survivin转染效率;采用Western blot方法检测上皮间质转化相关蛋白(E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白)和TGF-β/Smad-2信号通路关联蛋白(TGF-β1、p-Smad-2、Smad-2)的表达情况;分析关联性。结果:1.在胃癌组织中,survivin蛋白阳性表达率为58.18%,上皮间质转化发生率为40.00%,survivin蛋白表达与上皮间质转化存在正相关关系(p=0.019)。2.在胃癌细胞系SGC-7901中,敲除survivin基因后,TGF-β1表达水平降低,p-Smad-2水平降低,Smad-2表达水平无明显变化,上皮间质转化标志蛋白E-钙黏蛋白表达上调,N-钙黏蛋白表达下调;转载慢病毒使survivin基因过表达后,TGF-β1表达水平升高,p-Smad-2水平升高,Smad-2水平无明显变化,上皮间质转化标志蛋白E-钙黏蛋白下调,N-钙黏蛋白表达增强;表明survivin可以通过TGF-β/Smad-2信号通路参与对胃癌上皮间质转化的调控。结论:1.胃癌中,survivin蛋白与上皮间质转化存在正相关关系。2.Survivin可以通过TGF-β/Smad-2信号通路参与对胃癌上皮间质转化的调控。
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