3β-羟基莪术醇水溶性衍生物是由3β-羟基莪术醇经过微生物的转化,利用高效液相层析分离纯化而得到的多种化合物。初步研究表明3β-羟基莪术醇及其水溶性候选衍生物具有抗病毒的潜力,可做进一步研究,为将其开发为抗病毒新药提供理论依据。　　 本研究在细胞水平采用犬肾细胞(MDCK Cell)和非洲绿猴肾细胞(VeroCell、Veto E6 cell)对3β-羟基莪术醇的21种水溶性衍生物开展了体外抗H1N1、HSV-2和EV71病毒的药效实验,采用病毒感染细胞定性实验(细胞病变)和定量检测方法(MTT法,荧光定量PCR);并设计了5个不同给药时间(-2h0h,2h,4h,8h);通过对不同病毒的CPE初筛实验,对有抗病毒作用的药物进行MTT和荧光REAL-TIME PCR实验,实验结果采用SPSS分析软件进行多个因素的方差分析。根据实验结果综合分析评价21种药物在不同浓度、不同给药时间对不同病毒(H1N1、HSV-2和EV71)的抗病毒药效。　　 实验结果表明:1)药物C09(2h)和C19(0h),C19(2h)具有较好的抗H1N1甲型流感病毒作用。2)药物C13、C16均在4h、8h加药具有抗HSV-2作用。3)药物C08(4h)和C12(4h)具有抗EV71作用。　　 本文结合实验过程的实际操作对实验方法(CPE、MTT、荧光定量PCR和空斑实验)进行了比较和讨论:1)CPE观察法于显微镜下定性观察细胞病变情况,该方法效率高,但结果受观察者主观影响大,适合初筛。2)MTT分析法是通过计数活细胞数目来反应细胞生存活力,该方法实验结果所反应的不是细胞数目的绝对数,而是反应细胞生存活力(cell viability),该结果易受细胞状态、细胞内代谢水平等因素影响,重复性差。3)空斑实验以测具有感染和复制能力的活病毒粒子为基础的实验方法,在药效学研究中可以真实反映病毒在药物作用下的感染复制能力,在药效学研究中广泛应用,其优点是检测的是具有感染性的活病毒粒子,缺点在于实验条件不容易掌握,重复性差。4)荧光定量REAL-TIME PCR法是基于带荧光基团的探针与模板DNA结合,发出荧光信号,通过采集荧光信号来反映体系中核酸含量,从而检测病毒基因的拷贝数。REAL-TIME PCR反应体系较为稳定,重复性好,数据较为可靠。　　 综上述,本研究可为抗病毒药物的体外药效学实验方法和实验结果分析与评价提供具有价值的参考。