压力性尿失禁患者阴道前壁病理形态学特征分析及平滑肌细胞凋亡检测

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:changjian200910
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目的:分析压力性尿失禁患者阴道前壁病理形态学特征,并探讨压力性尿失禁患者阴道前壁平滑肌细胞凋亡发生情况及意义。方法:以南京军区福州总医院妇产科2012年6月~2012年11月收治的压力性尿失禁患者30例(其中15例合并盆腔器官脱垂)和同期因妇科良性疾病行子宫切除的患者15例为研究对象。将所有的研究对象分为正常对照组(n=15例)、单纯尿失禁组(SUI组,n=15例)及尿失禁合并脱垂组(SUI+POP组,n=15例),手术过程中,取近似相同部位阴道前壁组织标本。应用HE染色、Masson三色染色、醛品红染色、CD31、S-100及actin免疫组化染色多种染色方法,在多个不连续视野观察两组患者阴道前壁的显微结构及病理形态学特征,同时采用ImageProPlus6.0图像分析软件定量分析两组间肌层结缔组织、平滑肌组织、血管及神经的分布及构成差异,并分析其与年龄、体重指数、绝经时限、合并脱垂程度及VLPP等临床参数相关性。在此基础上,采用TUNEL凋亡试剂盒检测三组间平滑肌细胞凋亡情况,RT-qPCR及Westernblot检测线粒体凋亡途径中的凋亡相关蛋白P53、BCl-2及Bax的mRNA及其蛋白表达情况,并分析凋亡相关蛋白的表达相关性及P53、Bcl-2、Bax、BCl-2/Bax与平滑肌凋亡指数、患者年龄、体重指数、绝经时限、合并脱垂程度及VLPP等临床参数的相关性。结果:(1)各种染色结果显示:相对于正常对照组,压力性尿失禁患者阴道前壁存在明显的病理形态学变化,主要表现为肌层较薄,面积较小,肌束细碎,肌纤维排列紊乱;胶原纤维散在分布,分布不规则;弹性纤维分布较少,且存在不同程度的断裂;外周神经纤维数量较少,且直径较小等。(2)定量分析结果显示:①正常对照组、SUI组及SUI+POP组肌层神经纤维数量分别为(3.1±1.4),(2.2±1.3)和(1.8±1.0)个,其中SUI组和SUI+POP组组间差异无统计学意义(P>0.05),但SUI组、SUI+POP组与正常对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05);②正常对照组、SUI组及SUI+POP组肌层神经纤维直径分别为(42.1±7.2),(33.2±6.8)和(31.8±4.7)μm,其中SUI组和SUI+POP组组间差异无统计学意义(P>0.05),但SUI组、SUI+POP组与正常对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05);③正常对照组、SUI组及SUI+POP组肌层血管面积分别为(2.2±1.0),(2.5±1.1)和(2.4±1.2)%,三组组间差异无统计学意义(P>0.05);④正常对照组、SUI组及SUI+POP组肌层非血管平滑肌面积分别为(56.9±9.4),(47.7±6.9)和(44.3±6.0)%,其中SUI组和SUI+POP组组间差异无统计学意义(P>0.05),但SUI组、SUI+POP组与正常对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05);⑤正常对照组、SUI组及SUI+POP组肌层结缔组织面积分别为(40.3±8.4),(50.7±7.3)和(54.9±6.6)%,其中SUI组和SUI+POP组组间差异无统计学意义(P>0.05),但SUI组、SUI+POP组与正常对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05);⑥阴道前壁肌层神经纤维数量和神经纤维直径与患者年龄、孕次、阴道分娩次数、绝经年限、VLPP及合并脱垂分度存在相关性(P<0.05);阴道前壁肌层中的血管面积与患者年龄、孕次、阴道分娩次数及绝经年限存在相关性(P<0.05);阴道前壁肌层中的非血管平滑肌面积与患者年龄、体重指数、孕次、阴道分娩次数、绝经年限、VLPP及合并脱垂分度存在相关性(P<0.05);(3)TUNEL及凋亡相关蛋白表达检测结果显示:①正常对照组、SUI组及SUI+POP组凋亡指数分别为(9.8±2.2),(18.1±4.7)和(20.2±5.4),其中SUI组和SUI+POP组组间差异无统计学意义(P>0.05),但SUI组、SUI+POP组与正常对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05);②正常对照组、SUI组及SUI+POP组凋亡相关蛋白P53、Bcl-2及Bax的mRNA相对表达量分别为(0.99±0.10),(1.02±0.09),(1.01±0.08);(1.37±0.27),(0.73±0.16),(1.33±0.20);(1.52±0.21),(0.68±0.12),(1.41±0.16),其中SUI组和SUI+POP组组间差异无统计学意义(P>0.05),但SUI组、SUI+POP组与正常对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05);③正常对照组、SUI组及SUI+POP组凋亡相关蛋白P53、Bcl-2及Bax的相对表达量分别为(0.52±0.16),(0.77±0.19),(0.83±0.21);(0.81±0.22),(0.53±0.14),(0.48±0.12);(0.44±0.14),(0.67±0.22),(0.83±0.16)。Bcl-2/Bax比值分别为(1.93±0.46),(0.93±0.49),(0.60±0.19),其中SUI组和SUI+POP组上述指标组间差异无统计学意义(P>0.05),但SUI组、SUI+POP组与正常对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05);④P53、Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax及凋亡指数之间存在相关性(P<0.05);P53蛋白表达与体重指数存在相关性(P<0.05);Bcl-2蛋白表达与年龄、绝经年限存在相关性(P<0.05);Bax蛋白量与年龄、孕次、阴道分娩次数、VLPP及合并脱垂分度存在相关性(P<0.05); Bcl-2/Bax及凋亡指数与年龄、BMI、孕次、阴道分娩、绝经年限、VLPP、合并脱垂分度存在相关性(P<0.05)。结论:(1)压力性尿失禁患者阴道前壁存在神经及肌肉的退行性病变,可能作为其发生发展的潜在病理机制;(1)压力性尿失禁患者阴道前壁肌层中非血管平滑肌细胞凋亡增加,可能与肌层平滑肌面积减少相关;(2)线粒体凋亡途径可能参与压力性尿失禁患者阴道前壁肌层中非血管平滑肌细胞凋亡调控。
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