烟草赤星病致病力分化及拮抗菌拮抗机制初步探究

来源 :贵州大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:tlling06990702
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烟草赤星病是烟叶成熟期的主要真菌病害,对烟草产量和品质有严重影响。目前对赤星病致病力分化的报道很多,不同菌株之间毒性差异较大,但总体上看该菌致病力多数处于中等偏上水平,表现为毒力强,危害严重,而毕节作为贵州省第二大主产烟区,关于赤星病的研究还没有相关报道,因此本研究采集毕节主要烟区病原菌对其进行致病力分化测试分析,并在此基础上对不同致病力菌株的生物学特性和四种胞外酶活性及与致病力的关系进行了初步探索。同时,毕节烟区可利用的生防菌资源较少,为合理开发适应本地环境的生防菌种,我们对分离自毕节烟区的生防菌L2对赤星病菌的拮抗作用和机理进行了初步探索,为开发防治烟草赤星病的生防菌剂提供了理论依据,主要研究结果如下:1、采用组织块培养法与单孢分离法进行病原菌的分离,通过形态学观察初步获得35株赤星病菌,之后挑选具有代表性的4个菌株进行了种的鉴定,其中Gzuf A-10、Gzuf A-39鉴定为链格孢(Alternaria alternata),Gzuf A-26、Gzuf A-40鉴定为细极链格孢(Alternaria tenuissima)。2、采用离体叶片菌饼法对35株赤星病菌进行了致病力检测实验,结果表明:不同菌株对感病烟草品种K326的致病力存在差异,35株赤星病菌病情指数在0-92.7之间,其中非致病菌株5株,强致病力菌株4株,较强致病力菌株4株,中等致病力菌株14株,弱致病力菌株8株。同时,经形态学观察显示菌株的穿透生长能力与致病力明显呈正相关。3、选取15株不同致病力菌株,分别测定了菌丝生长速率、产孢量、产毒量等生物学特性与致病力的关系,结果表明,菌株的菌丝生长速率和产孢量随着致病力的减弱逐渐增加;毒素产量则随着致病力的减弱而逐渐降低。4、选取不同致病力菌株:Gzuf A-26、Gzuf A-15、Gzuf A-28、Gzuf A-48、Gzuf A-47、Gzuf A-10分别测定了菌株在28℃下淀粉酶、纤维素酶、漆酶和愈创木酚酶4种胞外酶活性与致病力的关系。结果表明:强致病力菌株分泌的淀粉酶、纤维素酶活性比中等致病力和弱致病力的菌株高;但漆酶和愈创木酚酶活性变化不明显,没有表现出规律性,这说明毕节烟区赤星病病原菌分泌淀粉酶与纤维素酶活性的高低是造成致病力分化的重要原因之一。5、以烟草链格孢菌(Alternaria alternata)为指示菌,通过初筛与复筛获得1株高效拮抗生防菌株L2,经形态学、生理生化,分子等鉴定手段鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus magaterium)。6、对L2菌株的稳定性、L2菌株对赤星病菌的最佳作用方式及L2菌株对病原菌生长发育的影响进行了实验,结果表明:L2菌株的无菌滤液对热稳定,对紫外线稳定,在4-11de pH范围内稳定;在离体叶片上L2菌株对赤星病的最佳防治方式为钝化作用;L2菌株粗代谢物对菌株的菌丝生长、孢子萌发和产孢量均表现为抑制作用。在诱导植物抗性方面,结果表明L2菌株接种能够诱导烟草体内苯丙氨酸解胺酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性较未接种有不同程度的提高,其中PAL活性诱导后可达对照2倍多,可以说明诱导抗性是其生防作用机制之一。
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