盘状结构域受体1在小鼠腹膜纤维化中的作用及机制

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bisha1007
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目的:探讨盘状结构域受体1(DDR1)在高糖腹膜透析液诱导的小鼠腹膜纤维化过程中的作用及机制。方法:选取6-8周龄C57/BL雄性正常小鼠及C57/BL雄性DDR1+/-鼠,分为正常对照组、腹膜纤维化组、DDR1+/-对照组(DDR1+/-a组)及DDR1+/-纤维化组(DDR1+/-b组),每组各5只。适应性饲养1周后分别对正常对照组及、DDR1+/-a组小鼠腹腔注射0.9%生理盐水,对腹膜纤维化组及DDR1+/-b组腹腔注射4.25%腹膜透析液,1次/日,注射剂量:1mL/10g,持续4周。造模周期完成后,分别计算各组小鼠的腹膜透析超滤量(UF)、检测小鼠腹腔流出液中IL-6及CA125水平、留取四组小鼠的壁层腹膜组织,行HE染色及Masson染色、检测各组小鼠壁层腹膜组织中DDR1、胶原蛋白Ⅰ、平滑肌肌动蛋白α(a-SMA)及E-钙粘蛋白的表达水平。结果:1.与正常对照组相比,腹膜纤维化组腹膜透析超滤量均减少,且有统计学差异(P<0.01);与DDR1+/-a组相比,DDR1+/-b组腹膜透析超滤量呈下降趋势;腹膜纤维化组与DDR1+/-b组相比较,UF减少,且有统计学差异(P<0.05)。2.与正常对照组相比,腹膜纤维化组腹腔流出液中IL-6表达明显增加(P<0.0001);与DDR1+/-a组相比,DDR1+/-b组腹腔流出液中IL-6表达增加,且有统计学差异(P<0.0001);与腹膜纤维化组相比,DDR1+/-b组腹腔流出液中IL-6表达下降(P<0.01)。3.与正常对照组相比,腹膜纤维化组小鼠腹腔流出液中CA-125表达量明显下降(P<0.001);与DDR1+/-a组相比,DDR1+/-b组腹腔流出液中CA-125表达呈下降趋势;与腹膜纤维化组相比,DDR1+/-b组腹腔流出液中CA-125表达增加(P<0.05)。4.光镜下观察小鼠壁层腹膜组织形态学特征,病理切片染色显示,正常对照组壁层腹膜由一层扁平排列的细胞组成,腹膜纤维化组可见腹膜组织增厚,胶原沉积增加,表面细胞呈圆形、椭圆形,间质间有炎症细胞浸润;与DDR1+/-a组相比,DDR1+/—b组也表现出明显的纤维化;而DDR1+/—b组与腹膜纤维化组相比较,腹膜组织增厚及炎性浸润程度有所减轻。5.DDR1表达量:DDR1+/-鼠组(DDR1+/-a组及DDR1+/-b组)中DDR1表达水平整体较野生鼠组(正常对照组及腹膜纤维化组)低;但腹膜纤维化组较正常对照组DDR1表达略有所上升;与DDR1+/-a组相比,DDR1+/-b组DDR1表达也有所上调。6.胶原蛋白Ⅰ表达量:与正常对照组相比,腹膜纤维化组胶原蛋白Ⅰ表达明显上升,与DDR1+/-a组比较DDR1+/-b组胶原蛋白Ⅰ表达量也明显增加;DDR1+/-b组较腹膜纤维化组胶原蛋白Ⅰ表达下降。7.EMT标记物(α-SMA及E-钙粘蛋白表达量):腹膜纤维化组中α-SMA表达量较正常对照组增加,DDR1+/-b组与DDR1+/-a组相比,α-SMA的表达量也表现为增加。而与腹膜纤维化组相比,DDR1+/-b组小鼠腹膜组织中α-SMA表达下降;相反的,腹膜纤维化组中E-钙粘蛋白表达较正常对照组下降,DDR1+/-b组与DDR1+/-a组相比,E-钙粘蛋白表达同样减少,而DDR1+/-b组腹膜中E-钙粘蛋白较腹膜纤维化组表达增加。结论:1.本研究发现,DDR1在小鼠腹膜纤维化中起促进作用,抑制DDR1的表达可减轻腹膜纤维化。2.DDR1促进纤维化与促进调节EMT相关。3.抑制DDR1表达可能为纤维化的治疗提供一个新的靶点。
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