论文部分内容阅读
致病微生物污染食品引起的食物中毒是直接造成人体健康损害的主要食源性危害,目前尚缺乏快速和敏感的检测食源性致病微生物的方法,因此易造成实验室漏检和临床诊断的延误。单核细胞增生性李斯特氏菌(ListeriaMonocytogenes,LM)和肠出血性大肠埃希氏菌(Enterohemorrhagic E.coli,EHEC)O157∶H7曾在世界许多国家爆发流行并导致严重后果,引起了各国卫生部门的重视。本研究应用PCR方法检测了480份食品样品中的LM和EHEC O157∶H7。单增李斯特菌的PCR检测是特异性扩增该菌的溶血素A编码基因,目的片段长度为706bp。优化了PCR反应条件,进行了敏感性和特异性试验。试验结果表明,该方法的检测极限为3.3pg/μL的单增李斯特菌DNA;只有LM扩增出目的片段,其他非李斯特菌属菌种均呈阴性反应。480份食品样品中共检出LM阳性样品79份,阳性率为16.46%。EHEC O157∶H7的多重PCR检测方法是针对该菌的志贺毒素基因、菌体抗原基因和鞭毛抗原基因设计三对引物,同时扩增得到三条片段,长度为228bp、378bp和709bp。食品样品中检出1份EHECO157阳性样品,阳性率为0.21%。PCR检测结果与国标法检测结果相比,符合率为100%。PCR检测方法较传统检测方法更快捷经济。