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锥栗(Castanea henryi Rehd&Wils.)，属山毛榉科栗属植物，营养价值高，是福建北部特有产品和天然绿色食品。由于花期授粉不良和花期营养不良，常导致锥栗空棚。锥栗花序的生长发育状况是开花的重要前提，而雄花序过多，使锥栗营养流失严重，落花落果严重，最终导致低产。本研究以锥栗花序为材料，建立锥栗cDNA-AFLP技术体系，找出与花序分化相关的差异基因，克隆锥栗LFY基因，为解决锥栗花序分化与调控及缩短童期，提供理论依据。主要试验结果如下：1建立适合锥栗花序总RNA提取的方法采用两种植物RNA快速提取试剂盒、改良Trizol法和改良CTAB法提取锥栗花序总RNA。对比试验结果，表明：改良后CTAB法最合适，所得的总RNA产量高、比较纯净、完整，可用于后续的逆转录反应。2建立锥栗花序的cDNA-AFLP技术体系采用EcoRI和MseI进行双酶切，选用8条EcoRI引物和8条MseI引物，共组合成64对引物对进行选择性扩增，最后确定适合锥栗花序的cDNA-AFLP体系，20μl体系中，模板30ng、引物各1μl、10mM dNTPmix需要0.2μl、10×Ex-taq buffer需2μl和Ex-Taq(5U/μl)需要0.1μl。试验共回收20条差异条带，经二次扩增后再次回收，并进行载体连接后测序，通过NCBI进行blastn或blastp，共获得10条同源性高的序列。3锥栗花序LFY基因的克隆根据板栗LFY基因序列，在其ORF区设计上下游引物，扩增得到锥栗花序LFY基因片段1111bp，再根据此序列设计3’RACE引物，克隆得到锥栗花序LFY基因的3’端，最后拼接获得1389bp的序列，通过NCBI进行blastn和blastp，可知与板栗（ABB83126.1）同源性达99%。该基因序列已在GenBank进行登录，登录号为：JQ825167。