论文部分内容阅读
目的miniSTR技术是当今法医物证学研究高度降解检材的热点，本课题旨在研究3个miniSTR基因座（D10S1248，D14S1434和D22S1045）在中国成都汉族人群中的特征，构建复合扩增荧光标记检测系统及评估其法医学应用价值。方法使用Coble的引物，在中国成都200个无关汉族个体中进行3个miniSTR基因座PCR扩增，扩增产物使用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，银染法显色，以获得群体基本数据。建立这3个miniSTR基因座的复合扩增体系，利用荧光复合扩增技术扩增，ABI PRISM? 310基因分析仪对产物进行检测，GeneScan3.7及Geno Typer3.7软件分析结果；并按照美国DNA分析方法技术工作组（Scientific Working Group on DNA Analysis Methods，SWGDAM）的指导方案进行法医学应用性研究，用不同的组织、不同的介质、常见的动物对复合扩增系统进行测试，用实际案例进行验证。结果获得了3个miniSTR基因座的基因频率、个人识别率、非父排除率等群体遗传学数据，在D10S1248基因座观察到了新的等位基因8，在D14S1434基因座发现了不同的重复序列；通过采用复合扩增方法，建立了D10S1248、D14S1434和D22S1045荧光标记复合扩增体系。法医应用性研究证明该体系与12种常见动物和微生物无交叉反应；可对2ng的微量DNA模板分型；对同一个体的不同组织检测结果一致；能够对常见介质上的斑痕检材正确分型；对放置20年的陈旧血痕仍然可分型；应用于案例检测，结果与鉴定结论一致。结论3个miniSTR遗传标记（D10S1248，D14S1434和D22S1045）在中国人群中有较高的多态性及较高的个人识别率，在不同的人群中存在遗传差异。建立了这3个miniSTR基因座的荧光标记复合扩增体系miniplex，该体系可运用于荧光标记毛细管电泳激光自动分析检测平台，具备法医学实践应用的可行性，为分析DNA降解检材提供了一个有效的途径。