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【目的】为研究乳酸菌对青贮饲料的发酵品质和有氧稳定的影响,本试验从青贮饲料中分离和筛选出优良的乳酸菌菌种,将其制成菌制剂加入到全株玉米中,测定青贮及有氧暴露后样品营养成分和有氧稳定性。为开发新的菌制剂产品以及生产中合理选用菌制剂提供理论指导,为青贮发酵进程和青贮料有氧稳定性的研究提供科学依据。【方法】(1)采用平板分离法从青贮饲料等样品中分离乳酸菌,通过细菌形态学、生理生化特征和16SrRNA基因序列分析相结合的方法进行鉴定。利用产酸、抑菌、产纤维素酶试验从分离株中初步筛选具有青贮潜能的乳酸菌菌株,经生长曲线、温度敏感性、耐酸性、耐盐性等试验比较选定乳酸菌的生物学特性和抗逆性,确定青贮优良乳酸菌菌株。(2)将青贮优良乳酸菌菌株制成单菌制剂或组合菌制剂添加到玉米秸秆中,装入聚乙烯包装袋中抽气密封青贮。分别在青贮过程中的第3、7、15、30d,以及青贮后开袋的第1、3、7、15、30d取样,采用涂布平板法对样品中的细菌总数、乳酸菌总数、酵母总数、真菌总数进行统计计数,探究青贮和有氧暴露过程中的微生物变化动态。同时进行各样品pH及DM、NDF、ADF、CP、WSC、NH3-N、LA、AA、PA、BA含量测定,揭示各阶段微生物动态变化与各营养成分的相关性,最终选出适合玉米秸秆青贮的最佳菌制剂。【结果】(1)在GenBank中进行乳酸菌各分离株16S rRNA基因序列的BLAST分析,与相应参考菌株的同源性均达到99%以上。(2)产酸性以菌株B2-8产酸最快,B3-1、B1-6、B1-3、B2-9、B4-5次之,菌株B1-7、B2-3、B2-7、B5-1、B5-2、B6-1、B7-1、B7-10、E2-3产酸相对较慢,但20h后亦能降到pH4以下,均显示有较好的产酸特性。各分离株上清液对供试霉菌均无抑制作用;对细菌的抑制作用,菌株B3-1抑菌谱宽、抑菌活性最佳,菌株B2-3和B2-8次之,菌株B1-6、B1-7、B2-7、B5-1、B5-2仅对金黄色葡萄球菌有抑制作用。各分离菌株均不产纤维素酶。(3)青贮过程中,各组乳酸菌数量均在第7d时达到最大,之后逐渐减少,青贮期各试验组乳酸菌数量均显著高于对照组(P<0.05)。酵母菌、霉菌数量在青贮初期快速增长,第3d达到最大,随后减少,分别于第15d、7d降到100CFU/g以下;有氧暴露后,各组乳酸菌数量持续减少,以对照组乳酸菌数量减少显著高于各试验组(P<0.05)。各组酵母菌、霉菌数量逐渐增多,以对照组腐败微生物数量显著高于各试验组(P<0.05)。(4)在青贮期和有氧暴露期各试验组的pH、WSC、NH3-N均显著低于对照组(P<0.05),各试验组DM、CP、NDF、ADF、LA、AA含量显著高于对照组(P<0.05),未检出PA、BA。【结论】(1)成功分离出32株乳酸菌,其中杆菌21株、球菌11株,经鉴定植物乳杆菌4株、发酵乳杆菌17株、屎肠球菌5株、肠系膜明串珠菌肠膜亚种1株、戊糖片球菌5株。(2)菌株B1-6、B1-7、B2-3、B2-8、B3-1、B5-2、B7-10、E2-3显示了较好的产酸能力和抑菌能力,具有良好的青贮潜力。通过生物学特性测定,最终选出菌株B1-7、B2-3、B3-1、B5-2、E2-3做实验室青贮。(3)全部乳酸菌组、同型乳酸菌混合组、植物乳杆菌B3-1组在提高青贮饲料发酵品质和有氧稳定性方面具有优势。