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目的:1.对比分析类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis RA）患者外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cells PBMCs）、关节积液单个核细胞（Synovial Fluid Mononuclear Cells SFMCs）与健康对照组（Healthy Control HC）的PBMCs中T细胞亚群的比例,寻找与RA疾病相关的的新型致病性T细胞亚群。2.研究分析RA患者的新型致病性T细胞在疾病中的活化状态,并将其与临床指标进行相关性分析。3.对RA患者的新型致病性T细胞进行亚群分类,并分析不同亚群在类风湿关节炎患者外周血（Rheumatoid Arthritis Peripheral Blood RAPB）和类风湿关节炎患者关节积液（Rheumatoid Arthritis Synovial Fluid RASF）中的差异性,从而推断炎症部位起到重要作用的新型致病性T细胞亚群。4.观察新型致病性T细胞对疾病活动性的影响,以及新型致病性T细胞同一炎症部位的B细胞的影响,从而研究其功能。方法:1.通过对于细胞数据库中的单细胞测序数据进行数据分析,观察了类风湿关节炎患者关节腔积液中不同聚类细胞的构成比例,及转录因子的表达,并据此进行细胞亚群的分类,对其中异常升高比例的Tph细胞亚群及其特异性表达的分子进行归类综合,并进一步通过流式细胞术进行检测。2.收集陆军军医大学附属西南医院的符合临床诊断标准的类风湿关节炎患者的外周血和关节积液153例作为类风湿关节炎试验组,选取17例采集自体检中心的体格检查合格的健康人作为健康对照组。3.利用密度梯度离心法,对类风湿关节炎患者的PBMCs,SFMCs进行提取,对提取出的细胞进行多色流式细胞术检测其细胞亚群构成,包括:滤泡T辅助细胞（Follicular helper T cell Tfh）(CD4+CD45RO+PD-1HiCXCR5+),外周T辅助细胞（Peripheral helper T cell Tph）(CD4+CD45RO+PD-1HiCXCR5-),以及检测其相关的表面标志物及细胞因子的表达,具体包括:HLA-DR,ICOS,CXCR3,CCR6,IFNγ,IL-17A,IL-4,IL-10,IL-21。4.对类风湿关节炎患者外周血和关节积液中的Tfh和Tph通过趋化因子受体表达及细胞因子分泌情况的差异性进行亚群分类,并分别将外周血和关节积液中的同一亚群进行统计学比较,从而寻找在关节积液中富集的细胞亚群,进而推断其在炎症部位的作用。5.对炎症部位富集的IL-21+T细胞亚群和IL-10+T细胞亚群与临床炎症指标的相关性进行分析,通过细胞亚群比例和不同炎症指标的相关性分析,得出与疾病具有紧密联系的细胞亚群,从而对临床的诊断和治疗起到指导和参考作用。6.将Tph和Tfh及其活化态细胞亚群比例与同一样本中所存在的B细胞各亚群比例,以及进行相关性分析,从而研究Tph和Tfh的供能。结果:1.RAPB中的Tph、Tfh比例相较于健康对照组有显著升高（P<0.001）,RASF中的Tph、Tfh比例相比较于RAPB有显著升高（P<0.0001）。在RAPB中的Tph比例显著高于Tfh（P<0.0001）,在RASF中的Tph比例也显著高于Tfh（P<0.0001）。2.在RAPB中,Tph与C反应蛋白（C-reactive protein CRP）水平呈正相关关系（P<0.001）;HLA-DR+Tfh与红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation Rate ESR）具有正相关关系（P<0.01）;ICOS+Tph与ESR具有正相关关系（P<0.01）,ICOS+Tfh与ESR具有正相关关系（P<0.01）;HLA-DR+Tfh与CRP具有正相关关系（P<0.05）;ICOS+Tph与DAS28评分具有正相关关系（P<0.05）。3.IL-21+Tph在RASF中的比例显著高于RAPB（P<0.05）,IL-10+Tph在RASF中的比例显著高于RAPB中（P<0.0001）,IL-10+Tfh在RASF中的比例显著高于RAPB中（P<0.0001）,RASF中的IL-10+Tph比例与RASF中的IL-10细胞因子浓度具有正相关关系（P<0.05）。4.在RAPB中,IL-21+Tfh与ESR具有正相关关系（P<0.01）,IL-21+Tfh与CRP具有正相关关系（P<0.01）;在RASF中,IL-21+Tfh与ESR具有负相关关系（P<0.05）,IL-21+Tfh与CRP具有负相关关系（P<0.05）。结论:1.RA患者外周血和关节积液中存在一种表型PD-1HiCXCR5-的Tph细胞亚群,相比较于健康对照组显著升高,提示Tph是疾病诊断的敏感指标,可以作为类风湿关节炎疾病的诊断标志物。2.活化态Tph与RA疾病活动性指标具有显著相关性,提示活化态Tph具有促进疾病炎症发展的作用,同时活化Tph可以作为疾病进展程度的生物标志物之一。3.可以对Tph进行亚群分类,IL-10+Tph亚群在关节积液中相较于外周血有显著升高,提示IL-10+Tph细胞在炎症部位发挥重要作用。4.RA患者外周血和关节积液中IL-21+Tph与IL-21+Tfh亚群的比例与疾病活动性具有显著的正相关性,提示IL-21+Tph与IL-21+Tfh具有直接的促炎作用。