低浓度离子液体对秀丽隐杆线虫的Hormesis效应及相关机理研究

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离子液体由于其良好的溶解性能、热稳定性和几乎为零的蒸汽压等优异性能,在很多领域得到了应用,随着离子液体的广泛应用,离子液体的生物毒性以及较差的降解性能逐渐受到关注。目前对离子液体毒性的研究主要集中于致死剂量的研究,而关于离子液体的hormesis效应的研究却很少。所以本文考察了咪唑类溴盐离子液体对秀丽隐杆线虫不同检测终点的Hormesis效应,并对其可能的机制进行了探究。我们分别检测了不同取代基链长、不同浓度的咪唑类溴盐离子液体对线虫寿命、耐热性、体长、生殖能力以及神经活性的影响,重点考察是否存在Hormesis效应。实验发现不同烷基链长的离子液体对秀丽线虫的不同检测终点毒性作用强度不一致,离子液体对线虫的寿命、耐热性、体长、神经毒性存在Hormesis效应,但出现促进作用的浓度和烷基链长并不一致,离子液体对线虫的生殖毒性则没有明显的剂量-效应关系,没有观察到hormesis效应。实验结果表明,三种离子液体低浓度时都可以延长线虫的寿命。为探讨其可能的作用机制,我们分别检测了暴露于0.01 mg/L的三种咪唑类离子液体2天、5天、7天、9天和11天后,线虫体内活性氧(ROS)、脂褐质的累积水平和sod-5、daf-16基因的表达,发现线虫体内ROS水平相对于不添加离子液体的线虫来说,短期内ROS含量增加,随后逐渐降低。而氧化相关基因sod-5和寿命相关基因daf-16的表达在暴露2天、5天、7天后略有上调,当暴露时间达到9天和11天时,则有明显的上调。因而我们认为低浓度离子液体可能是通过ROS的去除和相关基因表达的上调来延长线虫的寿命,同时,根据ROS随时间的变化趋势我们推测线虫的hormesis效应是由过度补偿的机制引起的。由于线虫的致死率是最基本也是最常见的毒性检测终点,急性、慢性致死率,寿命、耐热性等都需要检测致死率。而传统的线虫致死率检测方法十分费时,并且可能会给线虫带来机械损伤,因而本论文中,我们探索了一种快速简便的检测线虫致死率的方法,该方法包括图片获取和软件分析两大部分。将电耦合器件图像传感器安装在体视显微镜的目镜筒上,连接电脑。通过蓝色强光的照射使活线虫产生运动,使用Toupview软件对显微镜下的线虫进行录像。Nematode Count软件根据线虫的视频获得线虫的运动轨迹,并用亮黄色显示出。根据亮黄色区域的个数,可获得活着的线虫数,致死率即可得出。
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