【摘 要】
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摘要本文着重于旧本血吸虫(S.japonicum)表位疫苗的研究,包括以下两个部分:一日本血吸虫有效抗原表位的筛选.结果表明,获得了3种SjFer抗原表位,它们都具有部分的免疫保护性.
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摘要本文着重于旧本血吸虫(S.japonicum)表位疫苗的研究,包括以下两个部分:一日本血吸虫有效抗原表位的筛选.结果表明,获得了3种SjFer抗原表位,它们都具有部分的免疫保护性.分离鉴定日本血吸虫85kDa金属蛋白酶的模拟表位,并探讨其对小鼠的免疫保护效果.二日本血吸虫多表位疫苗的构建和免疫保护效果研究,构建多表位日本血吸虫DNA疫苗,探讨其对小鼠的免疫保护性.结果表明,成功构建了重组质粒pcDNA/Sjpt(pt为polytope的缩写),双酶切片断与预期大小一致,测序结果表明插入片断与设计序列完全一致;pcDNA/Sjpt在HEK293细胞中表达的蛋白包括了全部4个片断,且均具有抗原性.构建日本血吸虫重组表位蛋白疫苗,并探讨其对小鼠的保护性免疫.结果表明成功构建了重组质粒pGEX/Sjpt;重组质粒双酶切片断与预期大小一致,测序结果与设计序列一致;转化菌经IPTG诱导后表达产物与预期的大小一致,经Western blot分析,表达产物具有良好的抗原性;重组蛋白能诱导小鼠产生特异性抗体和部分的免疫保护力,减虫率和减卵率分别为35.2％和41.9％,与佐剂组相比差异显著(P值均小于0.001).观察合成表位多肽疫苗诱导的抗日本血吸虫的体液免疫应答.结果表明,这4个合成表位多肽具有良好的抗原性和免疫原性,与KLH连接后能诱导明显的抗体反应和显著的细胞毒作用.该研究对日本血吸虫候选抗原分子31和32 kDa联合免疫山羊的保护效果进行了探讨.研究表明,日本血吸虫候选抗原分子31和32 kDa能诱导山羊产生部分的免疫保护力,为兽用血吸虫病疫苗的研制奠定了基础.
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