目的采用组织块培养法从犬年轻恒牙根尖牙乳头组织中分离培养出根尖牙乳头干细胞(stem cell from apical papilla,SCAP),探索其自我更新和多向分化能力,为SCAP的进一步研究应用奠定基础。方法拔除犬健康年轻恒牙获取根尖牙乳头组织,采用组织块培养法分离培养犬根尖牙乳头细胞,详细观察、记录细胞的形态和生长特性;流式细胞术鉴定干细胞表面标记物;进行平板克隆形成实验;细胞免疫荧光鉴定胞浆蛋白;体外进行成骨、成脂诱导分化及鉴定。结果采用组织块培养法可从根尖牙乳头组织中分离培养出贴壁的短梭形或星形的成纤维样细胞,自我增殖能力强,克隆成形率为(116.83+12.608)/600,非常高。间充质干细胞表面标记分子STRO-1、CD90、CD24表达阳性,但是CD34表达阴性。胞浆中巢蛋白(Nestin),波形蛋白(Vimentin)表达阳性、牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)表达阴性或极弱阳性。成骨诱导分化后可见矿化结节,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),DSP表达阳性,成脂诱导分化后形成脂滴;诱导分化后经逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)分析,表明特征性分化标记分子骨唾蛋白(bone sialoprotein,BSP)、DSP、RUNX2、脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)均阳性表达。结论利用组织块培养法,可从犬根尖牙乳头组织中稳定分离培养出根尖牙乳头细胞,经鉴定,其中存在根尖牙乳头干细胞,增殖能力强,具备成骨/成牙本质,成脂多向分化潜能。本实验是动物体外的初探性研究,对进一步体外、甚至体内SCAP的研究具有指导价值,为SCAP有效应用于牙髓组织工程奠定基础。