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禽白血病(avian leucosis,AL)是由禽白血病病毒引起的、以发生多种传染性的良性和恶性肿瘤为特征的禽类疾病。该病呈水平和垂直传播,能够引起机体组织的多发性肿瘤疾病,使机体的免疫机能下降甚至丧失,严重制约了养禽业的健康发展。为了降低该病对养禽业的危害,防止禽白血病病毒的进一步演变,及时掌握该病的流行情况对监控和净化禽白血病具有重要的意义。本研究通过建立禽白血病病毒J亚群(ALV-J)荧光定量PCR方法,对当前吉林省禽白血病的流行状况展开进一步的调查,以此为本省的禽白血病的防控工作提供相关的理论依据。本研究的第一部分,建立ALV-J亚群的荧光定量PCR检测方法。根据GenBank中登录的禽白血病J亚群的基因序列,设计并合成相关的探针和引物。通过提取质粒制备ALV-J的标准品并建立标准曲线,利用矩阵法优化荧光定量PCR的反应体系和条件,分别对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检验。试验结果表明,建立的荧光定量PCR检测方法与禽白血病A/B亚群、鸡新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)均不产生交叉型反应,并具有良好的特异性;能够检测最低拷贝数为196copies/μL含量的病毒样品,与国标(GB/T 26436-2010)的检测结果相吻合且敏感性较好。因此,本方法具备良好的重复性和较高的灵敏度,可用于进一步的临床ALV-J的定性和定量检测。试验的第二部分,分别采集吉林省5个市10家种鸡场的2000份血清样本和2000份棉拭子样品。利用建立的ALV-J的荧光定量PCR方法和ELISA试剂盒分别进行ALV-J抗原和ALV-AB、ALV-J抗体、p27抗原的检测。检验结果显示吉林省地区种鸡场禽白血病ALV-AB亚群抗体总体阳性率为7.65%,ALV-J亚群抗体总体阳性率11.55%,p27抗原总体阳性率为14.55%。使用荧光定量PCR方法检测出248份ALV-J阳性样品,阳性率达12.40%。通过对建立的ALV-J荧光定量PCR方法与商品化的ALV-J检测试剂盒比较发现,两者检测符合率达到88.75%。其中,建立的ALV-J荧光定量PCR方法与ELISA方法相比具备良好的敏感性和检测优势。因此,吉林省内禽白血病流行性调查结果表明:吉林省内的种鸡场存在禽白血病病毒的普遍流行情况,并以ALV-J亚群的感染为主,应加大对禽白血病的防控和净化工作。