低温胁迫下嫁接黄瓜耐低温性双向电泳分析

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黄瓜又名胡瓜,起源于亚热带,对温度反应敏感,是我国保护地蔬菜生产中最主要的种类之一。近些年,随着反季节蔬菜需求量猛增,我国北方大棚黄瓜栽培面积日益扩大,但我国棚室结构简单,所以低温仍是影响黄瓜这种喜温蔬菜产量和品质的主要因子。研究表明,利用砧木进行黄瓜的嫁接栽培是克服冷害的一条有效途径,但是对于嫁接抗冷性的机理尚不清晰。本文以低温胁迫下黄瓜嫁接苗为材料,运用双向电泳技术,探究了嫁接黄瓜耐低温的分子生物学机制,为提高黄瓜抗冷性研究提供理论依据。1.以云南黑籽南瓜为砧木,博杰106黄瓜为接穗,采用十字插接法、劈接法、传统靠接法以及作者改进的嫁接方法轴插接法进行嫁接苗实验栽培,比较了几种嫁接方法的综合效果。结果表明:轴插接法相对于其他三种常用嫁接方法具有操作简单、成活率高、功效好、对接穗和砧木苗龄要求低等优点,是一种较好的人工嫁接方法,保证了优质实验嫁接苗的获取。2.为了验证嫁接能提高黄瓜抗冷性,本实验以博杰106、博杰610两个黄瓜品种为接穗,以黑籽南瓜为砧木获得嫁接苗,通过4℃低温处理,对嫁接苗和自根苗的POD活性、丙二醛积累量、脯氨酸积累量等一些抗冷性鉴定指标进行了测定。结果显示:低温胁迫下两个黄瓜品系的嫁接苗POD活性均大于自根苗、两品系嫁接苗丙二醛积累量均小于自根苗、两品系嫁接苗脯氨酸积累量均大于自根苗,并且在低温胁迫下同砧异穗得到的嫁接苗在低温耐受方面也有很大差异。证明了嫁接确实能提高黄瓜耐低温能力,同时实验还说明了黄瓜嫁接优势的获得可能是砧木和接穗二者优势品质的融合。3.为了了解嫁接黄瓜低温下的蛋白表达,探究嫁接优势产生的蛋白质分子生物学机理,实验以4℃低温处理48小时的嫁接黄瓜苗与自根苗为原材料,通过双向电泳技术对比分析了低温下嫁接苗叶片与自根苗叶片的蛋白质差异表达、低温下嫁接苗茎段和自根苗茎段的蛋白质差异表达以及低温下嫁接黄瓜根和25℃常温下嫁接黄瓜根的蛋白差异表达,初步分析结果显示:叶片差异表达量在二倍以上的点有60个,其中上调蛋白点22个,下调蛋白点38个;茎段中差异表达量在二倍以上的点有106个,其中上调蛋白点29个,下调蛋白点77个;根差异表达量在二倍以上的差异点有70个,上调蛋白点13个,下调蛋白点57个。这些差异点可能与嫁接苗抗冷机制有关。同时本实验还对黄瓜相关器官全蛋白双向电泳体系进行了一些优化,将为黄瓜蛋白质组学的研究提供一些参考。
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