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鲎素(tachyplesin)是一种由17个氨基酸残基组成的抗菌肽,具有广谱抗菌活性,能够抗细菌、抗真菌、抗病毒、抑制肿瘤细胞增殖和诱导癌细胞分化等生物活性,是一类具有巨大潜在应用价值的抗菌肽。本论文主要内容包括：鲎素对几种常见基因工程菌的抑杀研究；鲎素对里氏木霉的抗菌机理研究；设计鲎素基因在里氏木霉中的表达研究。本文首先研究了鲎素对几种常见基因工程宿主菌(大肠杆菌BL21、枯草芽孢杆菌WB800、枯草芽孢杆菌BS168、酵母菌GS115、里氏木霉QM9414)的抑杀及对其的敏感性,采用肉汤微量稀释法和MTT法测定了MIC(最小抑菌浓度)及其MBC(最小杀菌浓度),MIC值分别为10、10、10、20、40μg/mL, MBC值分别为20、20、20、40、80μg/mL。并在此基础上,考察了鲎素抗菌活力与作用时间之间关系,表明里氏木霉对鲎素有较高的耐受力,并认为丝状真菌里氏木QM9414作为鲎素的表达宿主有较大的潜能。为了探讨鲎素对里氏木霉的作用机理,本文考察了鲎素对里氏木霉细胞壁膜的影响,并进一步揭示了鲎素与里氏木霉基因组DNA的相互作用影响。结果表明,鲎素处理后,细胞壁膜的通透性都产生了影响；鲎素有效地抑制了原生质的恢复生长,降低了再生率；磷和胞内紫外吸收物质的泄漏。这些结果都表明鲎素对细胞质膜起作用,由于膜被破坏形成孔洞而达到杀菌的目的。确认了鲎素可以跨膜进入了胞内并损伤了基因组DNA,鲎素不仅能与基因组DNA结合,高浓度也能导致基因组DNA断裂,鲎素对DNA的作用方式是鲎素与里氏木霉基因组DNA双螺旋上的磷酸基团发生静电作用而结合,并且部分结构嵌入DNA分子沟槽中,对里氏木霉基因组DNA双螺旋结构产生了破坏作用。为实现鲎素抗菌肽的基因工程的高效制备,本文采用里氏木霉作为宿主,构建了鲎素组成型表达载体pAN-PSGT-Tac,并成功转化里氏木霉原生质体,采用了SDS-PAGE电泳分析表达产物以及RT-PCR检测鲎素RNA水平的表达,银铵染色的SDS-PAGE电泳并没有在目的蛋白大小2.3KDa处发现条带,表明鲎素基因在蛋白水平未表达或表达量过低；而RNA水平检测发现,RT-PCR产物测序结果与已知的鲎素基因序列存在差异,前者更短,而且存在多处碱基替换。