本文研究发酵海带对刺参的饲养效果,通过分析发酵海带蛋白含量的变化、发酵海带作为刺参饲料和饲料中添加壳寡糖对刺参生存与生长、消化酶活性及消化道菌群结构、刺参非特异性免疫机能等方面的影响来评价发酵海带作为刺参饲料的营养价值与开发前景,除此之外,文中还就发酵海带的条件优化、海洋酵母的筛选鉴定等内容进行阐述,具体研究结果如下:1、人为添加枯草芽孢杆菌进行海带发酵,其适宜发酵温度为30℃、适宜发酵时间为96 h,接种剂量为12%(w/v,108 cfu/m L),发酵后海带的粗蛋白含量为14.65%,相对提高15.17%。配合饲料中添加30%的发酵海带喂养刺参,在36 d饲养时间内能显著提高刺参特定生长率、血淋巴液溶菌活性、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、酸性磷酸酶活性(ACP)、蛋白酶活性和淀粉酶活性(P<0.05),但是对刺参体腔细胞数、纤维素酶活性无显著影响(P>0.05)。此外,投喂发酵饲料还可见刺参消化道异养菌总数、弧菌相对数量降低、芽孢杆菌相对数量升高等现象:异养菌总数由3.23×106 cfu.ɡ-1减少至2.86×106cfu.ɡ-1,弧菌相对数量由36.68%降低为26.82%,芽孢杆菌由8.92%升至15.01%。2、以黑曲霉发酵海带,适宜发酵温度为34℃,发酵时间120 h,接种剂量10%(w/v,108 cfu/m L),发酵后海带的粗蛋白含量为16.53%,相对提高27.64%。配合饲料中添加30%的发酵海带喂养刺参,在36 d的试验性养殖时间内能显著提高刺参特定生长率、血淋巴液溶菌活性、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性、蛋白酶活性和淀粉酶活性(P<0.05),但是对刺参体腔细胞数、纤维素酶活性无显著影响(P>0.05)。此外,投喂发酵饲料使刺参肠道异养菌总数、弧菌占总菌数比例低于原有水平。异养菌总数由3.23×106 cfu.ɡ-1减少至2.76×106 cfu.ɡ-1;弧菌相对数量由36.68%降低为29.12%。3、从自然海水中和刺参肠道中分离、筛选出6株酵母菌,运用生理生化和分子生物学方法对其进行鉴定,结果是:HS-1为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii),HS-2为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),H-4为胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa),H-5为双倒卵形红冬孢酵母(Rhodosporidium diobovatum),H-10为中国汉纳酵母(Hannaella sinensis),H-12为海滨红酵母(Rhodotorula marina);采用凯氏定氮法测定其粗蛋白含量等指标,结果显示:HS-1的生物量(g/L)及蛋白质含量(w/w)分别为5.95、33.131,HS-2分别为6.22、35.972,H-4分别为4.45、44.424,H-5分别为5.82、50.674,H-10分别为4.65、44.381,H-12为4.35、44.871,其中H-5的粗蛋白含量显著高于其他菌株(P<0.05)。选取双倒卵形红冬孢酵母发酵海带,经测定,其粗蛋白含量为14.51%,相对提高11.50%。配合饲料中添加30%的发酵海带喂养刺参,在36 d的试验期限内刺参特定生长率、体腔液溶菌活性、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性、蛋白酶活性和淀粉酶活性皆有显著提高(P<0.05),但是刺参体腔液中血淋巴细胞数量、纤维素酶活性并无显著变化(P>0.05),刺参肠道异养菌总数及弧菌所占比例则有所下降。异养菌总数由3.23×106 cfu.ɡ-1减少至2.81×106 cfu.ɡ-1;弧菌相对数量由36.68%降低为31.04%。4、在刺参基础饲料中分别添加0.5%、0.75%、1.0%、1.5%商品壳寡糖(青岛博智汇力生物科技有限公司,分子量<3000,纯度>97%)和1.0%自制壳寡糖进行刺参喂养试验,结果显示:饲料中添加壳寡糖能显著提高刺参特定生长率、体腔液溶菌活性、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性、蛋白酶活性和淀粉酶活性(P<0.05),但是,对刺参体腔液中的血淋巴细胞数量、纤维素酶活性等生理生化指标无显著影响(P>0.05),对刺参肠道异养菌、弧菌甚至是枯草芽孢杆菌则有抑制作用,弧菌、枯草芽孢杆菌分别在0.5%和1.0%浓度的培养液中不能继续增殖。从上述检测指标中还发现:购自于青岛博智汇力生物科技有限公司的壳寡糖在刺参饲料中的添加量达到0.75%时使用效果最显著;饲料中添加自制壳寡糖与商品壳寡糖喂养效果差异不大。综合上述可见,枯草芽孢杆菌、黑曲霉、海洋酵母发酵海带以及饲料中添加壳寡糖喂养刺参均能促进刺参生长,提高免疫酶活性和消化酶活性,并且能够降低肠道异养菌总数和弧菌比例。此外,壳寡糖对枯草芽孢杆菌和弧菌均有抑制作用。