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目的:观察FGF10 对体外培养的大鼠结膜上皮细胞增殖、凋亡及粘蛋白表达的影响。
方法:取SD 大鼠(5 只)结膜以组织块贴壁方式进行结膜上皮细胞的原代培养及传代,细胞角蛋白(cytokeratin,CK)染色鉴定;取第2~3 代细胞加入1、10、100及200 ng/mL FGF10 及10ng/mL FGF2 分别作用24、48 小时后用MTS 法检测细胞增殖;Annexin V/PI 染色,流式细胞法检测72 小时后的细胞凋亡情况;RT-PCR 和Western-blot 检测MUC1,MUC4 和MUC5AC 的mRNA 表达和蛋白合成。
结果:24 和48 小时后,FGF10 各组(10,100 和200ng/mL)及FGF2 组具有显著的促细胞增殖作用(p < 0.05),且两者无明显差异,其中FGF10 显示出时间依赖性和剂量依赖性;流式细胞法检测结果显示,FGF10 和FGF2 作用72 小时后,实验各组均能够降低细胞凋亡率,但与对照组相比差异无统计学意义(p > 0.05);FGF10 和FGF2 均能够促进粘蛋白MUC1、MUC4 和MUC5AC 三种粘蛋白mRNA 的表达和蛋白合成(p < 0.05),其中以100 ng/mL 组作用最显著,FGF10(100 ng/mL)与FGF2相比作用更加明显(p < 0.05)。
结论:FGF10 具有促进结膜上皮细胞增殖,增加MUC1、MUC4 和MUC5AC 的表达与合成等作用,可为一些眼表疾病的诊治提供理论依据。