乳腺癌是患病率最高的女性恶性肿瘤之一，乳腺组织局部雌激素含量过高是导致乳腺癌的主要原因。此外，机体内雌激素合成紊乱也会导致骨质疏松、肥胖、冠心病等多种常见疾病。雌激素结合激活雌激素受体(ERα/β)，分别通过其介导的基因组以及非基因组信号通路发挥其生理功能。芳香化酶是体内催化雌激素生物合的限速酶，它以雄激素为底物催化合成雌激素。通过降低芳香化酶表达量进而有效降低雌激素的生物合成是实现组织选择性调控雌激素合成的主要手段，但是目前尚缺乏相关的化学小分子手段。我们通过前期本课题组建立的雌激素筛选模型，筛选诸多不同结构化学小分子的雌激素合成活性，阐明其调控雌激素生物合成的机制，为治疗雌激素相关疾病的药物研发提供依据。本论文主要包含三部分。　　1.两个天然产物活性小分子(植醇、(22E)-麦角甾-6，9，22三烯-3β，5α，8α-三醇）调控雌激素生物合成活性及其机制的研究:利用基于人卵巢颗粒样KGN细胞的雌激素生物合成筛选模型，对从慈竹（Sinocalamus affinis）和粗状润楠(Machilus robusta)中获得的63个化合物进行活性筛选，得到两个具有组织特异性的抑制芳香化酶转录的活性小分子(植醇、(22E)-麦角甾-6，9，22三烯-3β，5α，8α-三醇）。作用机制研究表明，它们通过抑制芳香化酶启动子Ⅰ.3/Ⅱ的活性来降低细胞内芳香化酶mRNA及蛋白的表达，但不影响芳香化酶的活性。通过western blot检测到它们能够降低p38和CREB的磷酸化，且p38 MAPK抑制剂SB203580能够降低细胞内芳香化酶mRNA的量及芳香化酶的活性，暗示化合物通过影响p38 MAPK介导的CREB途径来调控启动子Ⅰ.3/Ⅱ的活性，从而调控芳香化酶的表达。　　2.2-芳基苯并呋喃类化合物调控雌激素生物合成活性的研究:利用基于磁微粒分离酶联免疫法的雌激素生物合成筛选模型，对合成的53个2-芳基苯并呋喃类化合物进行雌激素生物合成活性进行评价和构效关系分析。结果表明，结构中的寡糖链对化合物的促雌激素生物合成活性具有重要的作用。　　3.细胞膜结合的雌激素受体的特异性标记研究:细胞膜结合的雌激素受体(cell membrane-bound estrogen receptor,cmER)介导了雌激素的非基因组作用，但是其作用机制受限于能够有效区分细胞质和细胞膜雌激素受体的标记方法。通过对含有三个不同的特异性短肽A1，S6和ybbR的谷胱甘肽S转移酶融合蛋白分别进行体外表达，比较两个磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(Phosphopantetheinyl transferase)-AcpS和Sfp对三个融合蛋白的识别选择性。我们选取识别效率较高和特异性较好的A1短肽，将其构建到雌激素受体ERα的C端(ERα-A1)，结果表明该偶联并不影响ERα的蛋白质表达及其在雌激素作用下的转录，来源于大肠杆菌的PPTase-AcpS可以以辅酶A-生物素(Coenzyme A-biotin)为底物，将生物素特异性标记到细胞膜结合的ERα-A1。