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目的随着社会人口的快速老龄化,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)因其高患病率及对社会、家庭的影响日益受到广泛重视。因此,全世界均意识到加强研究AD的病因与发病机制,以及开发有效的防治措施和药物的重要意义。本研究深入探讨固本健脑法治疗AD的作用机理,阐释固本健脑治则治法理论的科学内涵,为寻求中医改善学习记忆、治疗AD的方药提供依据,丰富中医固本理论及中医防治AD理论的内容。方法1.理论研究：采用文献研究方法,系统回顾中医学从先后天之本认识老年性痴呆的理论,结合团队相关研究成果入手,系统阐述固本健脑法治则治法理论。2.实验研究：围绕tau蛋白过度磷酸化损伤是AD发病的核心机制,以抑制tau蛋白过度磷酸化、保护树突棘的信号传导功能为靶点,选用安理申作为西药对照,运用固本健脑法对AD大鼠模型进行干预,观察其对AD模型的作用并探讨其作用机制。取12月龄SPF级Wistar大鼠70只,雌雄各半。适应性喂养1w后,随机分为7组,分别为正常组、空白对照组、模型组、固本健脑液高剂量组(简称固高组)、固中组、固低组和安理申组,每组10只。正常组不予处理。模型组和各治疗组给予双侧海马脑立体定位注射5μg/μl浓度的A β1-42：复制AD模型,空白对照组注射等位点等剂量生理盐水。3d后,各治疗组分别按照10ml/kg·d给予相应药物浓度的固本健脑液和安理申混悬液灌胃,模型组与空白对照组则按照相同剂量给予生理盐水灌胃,连续4w。灌胃结束后,对各组大鼠分别进行水迷宫定位航行实验和空间探索实验,观察固本健脑法对AD大鼠模型行为学的影响。高尔基染色法观察各组大鼠海马神经元树突棘形态变化及密度改变。RT-PCR法检测各组大鼠海马EphB2、PARP-1水平变化。Western Blot法检测各组大鼠海马总tau、P-tau(Ser199, Ser396,Thr231位点)、EphB2、PARP-1表达变化。观察固本健脑法对AD大鼠模型学习记忆能力、树突棘形态及tau蛋白过度磷酸化的作用,以探讨其防治AD的作用机制。结果1.固本健脑法对AD大鼠模型行为学的影响定位航行实验中,模型组大鼠找到水下隐匿平台潜伏期明显长于正常组(P<0.01),各治疗组潜伏期明显短于模型组(P<0.01),且固高组、固中组潜伏期短于安理申组(P<0.01)；目标象限游泳时间百分比比较,模型组明显低于正常组(P<0.01),各治疗组明显高于模型组(P<0.01),且固中组高于安理申组(P<0.05)。空间探索实验中,模型组大鼠找到原平台潜伏期明显长于正常组(P<0.01),各治疗组潜伏期明显短于模型组(P<O.01),且固高组、固中组潜伏期短于安理申组(P<0.05)；模型组大鼠穿越原平台位置次数明显少于正常组(P<0.01),各治疗组潜伏期明显多于模型组(P<0.01),且固高组、固中组多于安理申组(P<0.01)；目标象限游泳时间百分比比较,模型组明显低于正常组(P<0.01),各治疗组明显高于模型组(P<0.01),且固高组、固中组高于安理申组(P<0.05)。表明本研究的AD模型是成功的,固本健脑法能明显改善AD模型大鼠的学习记忆功能。2.固本健脑法对AD大鼠模型海马神经元树突棘的影响比较各组大鼠的神经元形态学发现,模型组大鼠海马区神经元树突棘密度明显低于正常组(P<0.01),各治疗组树突棘密度明显高于模型组(P<0.01),且固高组、固中组均高于安理申组(P<0.01)。表明固本健脑法能明显改善AD大鼠海马神经元树突棘的形态。3.固本健脑法对AD大鼠模型海马区P-tau的影响Western blot法检测各组大鼠海马tau、P-tau并比较P-tau水平,结果模型组大鼠较正常组明显升高(P<0.01),各治疗组明显低于模型组(P<0.01),且固高组、固中组均低于安理申组(P<0.01)。4.固本健脑法对AD大鼠模型海马EphB2表达的影响Western blot与RT-PCR法检测均显示：模型组大鼠海马EphB2表达较正常组明显降低(P<0.01),各治疗组大鼠海马EphB2表达明显高于模型组(P<0.01),且固高组、固中组大鼠海马EphB2表达均高于安理申组(P<0.05)。5.固本健脑法对AD大鼠模型海马PARP-1表达的影响Western blot与RT-PCR法结果均显示：模型组大鼠海马PARP-1表达较正常组明显升高(P<0.01),各治疗组大鼠海马PARP-1表达明显低于模型组(P<0.05),且固中组高于安理申组(P<0.05)。结论1.AD的发病与脾肾关系密切,先后天之本脾肾亏虚、脑髓失养,兼有痰瘀是其基本病机,固本健脑法是治疗该病的有效治法。2.固本健脑法能明显改善AD模型大鼠的学习记忆能力；提高海马神经元树突棘密度；升高海马EphB2表达,降低PARP-1水平,抑制tau蛋白过度磷酸化。3.固本健脑法能有效防治AD,改善临床症状,其机制可能与升高海马EphB2、降低PARP-1从而抑制tau蛋白过度磷酸化,保护神经元树突棘、保护神经元功能有关。