【摘 要】
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目的比较人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)与血管周细胞(pericytes)相关性能,研究是否可以用DPSCs取代Pericytes用于血管再生。方法组织块酶消化法培养DPSCs,采用
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目的比较人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)与血管周细胞(pericytes)相关性能,研究是否可以用DPSCs取代Pericytes用于血管再生。方法组织块酶消化法培养DPSCs,采用流式细胞仪对分离出的细胞的表面抗原进行检测。进行成骨、成神经诱导4周后,比较DPSCs和pericytes 2种细胞多向分化潜能。通过Matrigel体外成血管实验,分为DPSCs+HUVEC组和pericytes+HUVEC组在Matrigel上共培养,观察3h、7h、11h、14h、18h、24h、30h、36h和42h管腔样结构形成的情况,评价DPSCs和Pericytes稳定血管样结构的能力。Transwell试验评价DPSCs和Pericytes对HUVEC迁移行为的影响。每次实验独立重复≥3次,采用Graph Pad Prism 5软件对数据进行分析。数据以均数±标准差表示。P<0.05认为差异具有统计学意义。结果流式细胞术结果表明,DPSCs表面标记物CD105、CD73、CD90、CD29、CD44呈强阳性表达,CD34、CD45呈阴性表达,符合间充质来源的干细胞特征。分离培养的DPSCs呈长梭形、成纤维样,pericytes也呈长梭形,贴壁生长,表现出与DPSCs类似的形态学特征。成骨诱导4周后,经茜素红染色可见,DPSCs和pericytes的两组诱导组茜素红染色阳性,显示大量的红色的矿化结节。成神经诱导4周后,在倒置显微镜下观察可见两组细胞形态均发生变化,呈长轴突样,类似神经元样细胞的形态。2种细胞在Matrigel基质胶上与HUVEC共培养均能建立稳定的管腔样结构,至少可稳定维持到42h。在Transwell孵育12h后,各实验组上室中均有一定数量的HUVEC进入下室,统计结果表明,DPSCs和pericytes对HUVEC在体外培养条件下均有较强的趋化作用,两者间无统计学差异(P>0.05)。结论DPSCs具有与Pericytes相似的形态和功能特征,可以尝试用于体外血管再生。
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