高氨氮利用酵母筛选及其固态发酵苜蓿粉的应用研究

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蛋白质饲料短缺已成为限制我国畜牧业高质量发展的关键问题,而单细胞蛋白(single cell protein,SCP)在解决蛋白质饲料短缺方面具有很大潜质,现已经作为饲料添加剂应用于动物的日粮中。其中,酵母(saccharomyces)作为单细胞蛋白在饲料中已经广泛应用,但是酵母对非蛋白氮的转化效率并不高。因此从根本上明确酵母氨同化反应机制,促进酵母单细胞蛋白质营养物质的转化效率,降低成本,提升经济效率,具有重要意义。本研究从不同样品选培酵母,通过分析酵母的菌体干重、氨氮利用率、蛋白质含量,筛选出具有高氨氮利用能力的酵母,测定氨同化关键酶活性,最后将酵母应用于苜蓿粉中进行固态发酵,评选高氨氮转化效率的酵母。试验结果如下:从土壤、奶制品和水果筛选出8株功能酵母且均能利用铵态氮,其中酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)J1、胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)N5、戴尔有孢圆酵母(Torulaspora delbrueckii)GBL1这3株酵母表现优良,酿酒酵母J1蛋白质含量最高达到62.22%,胶红酵母N5的氨氮利用率最高达到88.44%,戴尔有孢圆酵母GBL1的菌体干重最高达到1.19 mg/ml。这3株具有较高氨氮利用能力和生长性能的酵母可能在提高饲料蛋白方面具有一定的应用价值,其高氨氮转化机制值得研究。测定这3株高氨氮利用能力酵母的氨同化关键酶活:谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH),谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS),谷氨酸合成酶(glutamate synthase,GOGAT)。酿酒酵母J1的这3种酶活性最高分别达到18.97 U/m L、0.85μmol/h/m L、13.30 U/m L,胶红酵母N5为11.574 U/m L、0.30μmol/h/m L、6.75 U/m L,戴尔有孢圆酵母GBL1较差为11.574 U/m L、0.28μmol/h/m L、6.5 U/m L。将3株酵母对苜蓿粉进行固态发酵,在不同发酵时期对各项指标进行测定。发酵后苜蓿粉的粗蛋白、真蛋白、可溶性蛋白、过瘤胃蛋白、氨基酸含量显著高于对照组(P<0.05),氨态氮的含量显著低于对照组(P<0.05),酿酒酵母J1发酵后苜蓿粉的相对饲喂价值最高,发酵后增加了酵母和乳酸菌的数量,减少了大肠杆菌(Escherichia coli)和霉菌(fingunt)的数量,酿酒酵母J1固态发酵苜蓿粉是最有利的,胶红酵母N5次之。酿酒酵母J1,胶红酵母N5,戴尔有孢圆酵母GBL1这3株酵母具有较高的氨氮利用率。在酵母氨同化相关酶活性中酿酒酵母J1和胶红酵母N5的GDH、GS、GOGAT这3种酶活性相对较高。并且这2株酵母固态发酵苜蓿粉改善其品质的效果最好。这些结果证实了酿酒酵母J1,胶红酵母N5可以作为酵母类单细胞蛋白饲料发酵的优良菌株,解决蛋白饲料短缺问题。
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