集胞藻6803slr0151基因的功能研究

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单细胞蓝藻集胞藻6803是第一个完成全基因组测序的光合生物,其光合机器组成和功能与叶绿体类似。它既能进行自养生长又能进行异养生长,而且具有天然的遗传转化能力,是研究光合作用的重要模式生物之一。近年来,随着功能基因组学的发展,很多基因的生物学功能得到阐释。然而,该藻种基因组中仍有近三分之一的基因功能未知,限制了人们对光合作用等重要生理过程及其调控机制的认识。本实验室在前期的功能蛋白质组学研究中鉴定到了众多逆境响应蛋白,其中有相当数量被注释为功能未知蛋白,揭示这些基因/蛋白的生物学功能是后基因组时代富有挑战性的研究任务。  本文以一个应答盐、碱胁迫的功能未知基因slr0151为研究对象,采用反向遗传学研究策略对该基因及其编码蛋白Slr0151的生物学功能进行了系统研究。结果表明:Slr0151是一个定位在细胞质膜和类囊体膜上的内在膜蛋白。slr0151的失活导致细胞的光自养生长速率降低约10%,细胞内有功能的PSⅡ含量明显减少,放氧复合体稳定性降低,但对PSⅠ功能影响不大。在高光胁迫条件下,该基因的失活导致PSⅡ修复效率降低,使细胞对光抑制更为敏感。进一步的生化分析表明,在光抑制过程中D1蛋白积累量和合成速率均明显降低,且PSⅡ组装中间复合体由CP43b转化为CP43a的过程受阻,这些可能是造成其PSⅡ修复效率降低的原因。此外,酵母双杂交和pull-down实验结果显示,Slr0151能与D1、CP43等PSⅡ核心蛋白发生相互作用。根据这些结果我们推测,Slr0151是一个新发现的蓝藻PSⅡ修复辅助因子,在PSⅡ的高效修复过程中发挥重要作用。
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