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[目的]①明确脱氧胆酸促进结直肠上皮细胞增殖的作用②研究miRNA223-3p在大肠癌细胞及大肠癌组织中表达上调或下降,探讨miRNA223-3p是否可以作为临床上诊断大肠癌的一个指标。[方法]①将CCD841细胞用不同浓度的脱氧胆酸处理(浓度分别为0μmol/L、5μmol/L、20μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、150μmol/L,200μmol/L 和300μmol/L),分别于加药24h、48h、72h、96h后用CCK8法测定吸光度值(A),测定细胞增殖活性。②采用基因芯片检测此次试验细胞增殖最高浓度的脱氧胆酸处理后的肠上皮细胞CCD841与未经处理的CCD841细胞中miRNA(实验组与对照组各三例)的表达情况,预测此次试验有关miRNAs。③qRT-PCR检测HT29细胞与CCD841细胞中预测的miRNA223-3p表达是否一致;qRT-PCR检测大肠癌组织与正常癌旁组织上miRNA223-3p的表达是否符合要求。[结果]①加入不同浓度的脱氧胆酸处理的细胞后,用CCK8法检测细胞增殖活性,结果发现脱氧胆酸对结直肠上皮细胞株有促进增值的作用,且这种促进增殖的作用呈剂量依赖性。经过脱氧胆酸处理24h后浓度为5、20、50、100、150,200 和 300 μmol/L 时对应细胞增值率分别为 131.3%,150.3%,122.0%,111.0%,119.0%,117.5%,105.3%;经过脱氧胆酸处理48h后按前者所列浓度顺序排列时细胞增值率分别为 128.7%,144.8%,126.0%,117.0%,105.3%,90.9%,81.4%,经过脱氧胆酸处理72h后细胞增值率分别为108.6%,111.6%,92.0%,99.2%,49.1%,42.4%,41.8%;经过脱氧胆酸处理96h后细胞增值率分别为131.2%,149.3%,114.4%,101.5%,90.1%,33.3%,20.9%;当浓度大于 200μmol/L,作用时间超过48h时脱氧胆酸对结直肠上皮细胞表现为毒性作用,当浓度为20μmol/L时且作用时间为24h时促进细胞增值的作用最强。②基因芯片结果显示差异表达的miRNAs共56种,其中上调25种,下调31种;差异性表达不明显的miRNAs共569。随机选取1条下调的miRNA(miRNA223-3p)进行qRT-PCR实验。③qRT-PCR检测HT29细胞与CCD841细胞之间的miRNA223-3p溶解曲线和扩增曲线良好,且表达都是实验组比正常组低。在随机选取的12对大肠癌组织和正常癌旁组织中验证miRNA223-3p的表达,与基因芯片检查结果一致。[结论]①脱氧胆酸可促进结直肠上皮细胞的增殖。且这种促进作用与脱氧胆酸浓度和作用时间有关,脱氧胆酸对结直肠上皮细胞的作用呈双向性。当浓度小于200 μmol/L时,作用时间不超过24小时可明显促进CCD841增殖。表现为当脱氧胆酸浓度为0、5、20μ mol/L时脱氧胆酸促进结直肠上皮细胞增殖的作用不断增强,作用时间为24h时促进增殖的作用最明显;50 μmol/L浓度的促进作用比20 μmol/低。当浓度大于200 μmol/L,作用时间超过24h甚至有细胞毒作用。②DCA处理的CCD841细胞中基因芯片检测miRNA223-3p表达下调,用qRT-PCR检测细胞中miRNA223-3p表达均符合要求且都是实验组比正常对照组低。在组织上验证miRNA223-3P表达,与基因芯片检查结果一致,且miRNA223-3p的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位无关,与肿瘤TNM分期有关。预测miRNA223-3p可作为结直肠癌检测的新途径。