论文部分内容阅读
本论文采用逐渐驯化法对LactobacillusacidophilusInd-1(La-1)、LactobacillusacidophilusInd-2(La-2)和LactobacillusacidophilusInd-3(La-3)进行有氧驯化,并运用喷雾干燥技术对驯化成功的一株L.acidophilus进行微胶囊化,并测定所得微胶囊的性能。研究内容及结果如下:
1.La-1和La-2驯化后的菌体生长旺盛,菌落较大,而La-3的驯化后菌落较小,故淘汰,驯化成功的两株耐氧菌株命名为La-XH1、La-XH2,为革兰氏阳性,其菌落呈圆形、乳白色、隆起、光滑,菌体呈短杆状和球杆状,单个或成双排列,不运动,无分支,无鞭毛,大小为(0.6~0.9)×(1.5~6.0)um。其生长和pH曲线符合一般细菌生长规律。
2.通过从阿拉伯胶、明胶、可溶性淀粉、β-环糊精和脱脂奶粉中筛选出阿拉伯胶和β-环糊精(1∶9)最佳包埋La-XH1的组合,在生物相容性上对La-XH1没有任何毒害作用;选取3种单保护剂和4种复合保护剂在同等条件下进行喷雾干燥,筛选出2号复合保护剂对菌体有保护作用,可以使活菌数提高27%。
3.在喷雾干燥工艺参数的正交试验中,得出最佳组合:壁材为20%、芯材比例为6%、进风温度为170℃。微胶囊中的嗜酸乳杆菌能够达到1.5×109cfu/g,包囊率和包埋产率分别为67.33%和18.36%。微胶囊样品在扫描和透射电镜下观察呈圆形或椭圆形;通过粒子直径分析仪测定的微胶囊粒子直径大小分布在1~130μm之间,平均为20μm。
4.采用经典恒温法和恒温加速法对微胶囊的热稳定性进行研究,在室温(25℃)下,103h微胶囊中活的嗜酸乳杆菌会下降一个指数;在4℃下,104.6h微胶囊中活的嗜酸乳杆菌下降一个指数。在湿稳定性试验中,湿度大于75%时,微胶囊在外观上和活菌数上都有变化,因此微胶囊应该在湿度小于75%、温度相对较低的环境中储存。
5.采用Horn法进行小白鼠的急性毒性试验,检测微胶囊的生物安全性,按2.15g/kg、4.16g/kg、10.00g/kg、21.50g/kg体重剂量给其中4组动物灌胃染毒1次并设对照组,灌胃14d后小鼠精神状态良好,增重0.8~1.0g,表明此产品的小鼠经口LD50>21.5g/kg,实际属无毒物质。
6.用肠溶性空胶囊包装L.acidophilus微胶囊作为产品,每粒中的活菌数可达到2.5×108cfu。在对产品进行模拟各种胃肠环境pH中,产品在人工胃液和pH5.8以下2h内不释放,在pH6.8溶液中1h部分释放,随着产品在肠道中时间的延长和pH的增高而释放完全。同时模拟产品在外壳破裂1h后,微胶囊中的菌体在pH2.2以下存活率很低,但仍然能够达到104cfu/m1,在pH高于5.0时,菌体不仅能够保持存活,而且还能够生长。