金属硫蛋白(metallothionein，MT)是一类低分子质量、高巯基含量、能结合金属离子具有独特性能的一类金属结合蛋白质，广泛存在于从细菌到哺乳动物的多种生物体内，具有金属解毒、清除自由基、抗电离辐射、抗细胞凋亡、增强机体对抗不良状态的适应能力等多种功能。目前，国内市场上常见的MT多数是从兔肝中提纯，但生产工艺复杂、产量低、价格昂贵，使其应用和研究受到限制，广泛的MT原料来源已成为制约该领域发展的瓶颈之一。　　本研究以褶牡蛎（Crassostrea plicatul）为原料，在金属96h急性毒性实验基础上，研究单一元素及多种元素混合暴露途径下对牡蛎MT的诱导效果，获得褶牡蛎MT的最佳诱导条件，并优化提取纯化工艺，获得牡蛎MT，为海洋贝类高值化开发和利用提供理论依据。主要研究结果如下:　　1.采用静水实验法，在水温18±1℃，盐度26～28，pH为8.0±0.2的环境下，测定硫酸锌(ZnSO4·7H2O)、氯化镉(CdCl2·2.5H2O)、醋酸铜(Cu(CH3COO)2·H2O)、重铬酸钾(K2Cr2O7)、亚硒酸钠(Na2SeO4)对褶牡蛎的急性毒性。结果表明，Zn2+、Cd2+、Cu2+、Cr6+、Se4+对褶牡蛎96h-LC50分别为2.59、4.10、8.83、81.84、378.06mg/L。　　2.根据急性毒性实验结果，Zn2+、Cd2+、Cu2+、Se4+、Cr6+分别选取96h-LC50的1/16、1/8、1/4、1/2为浓度梯度，经诱导1、2、3、4、5d，测定组织MT的含量。结果表明，Cd2+、Se4+对MT有较为显著的诱导，一定范围内MT的增加量与Cd2+、Se4+浓度呈现时间-效应及剂量-效应。其中，0.5mg/L的Cd2+浓度处理组MT诱导效果最好，达0.165mg/g湿重，诱导率106.3％。1mg/L的Se4+处理组MT诱导效果较好，达0.103mg/g湿重，诱导率为39.2％。　　3.在单一元素诱导基础上，在各元素安全剂量及显著诱导水平上设计浓度梯度，研究5d内多种元素混合暴露途径下对牡蛎MT诱导效果，并筛选出褶牡蛎MT的最佳诱导条件。结果表明，多种元素(Zn2+、Cd2+、Cu2+、Cr6+、Se4+)混合诱导，牡蛎MT的诱导效果可在短期内显现出来，但由于金属之间的相互作用，会影响各个金属在生物体内的吸收代谢途径，因此，MT随时间、多元素联合剂量波动较大，不利于对MT诱导过程的实施和控制。一定浓度下的Zn2+-Cd2+、Se4+-Cd2+联合诱导可显著升高MT表达量，Se4+浓度为0.2mg/L、Cd2+浓度为0.5mg/L的元素浓度组合为最佳选择，最佳诱导温度为20℃，诱导量达0.203mg/g湿重。　　4.以Tris-HCl作为缓冲液，通过单因素实验选取对提取效果影响较大的4个因素(pH、温度、缓冲液浓度、物料比)，在4因素3水平基础上进行响应面实验。确定最佳提取条件为:pH9.0，提取温度30℃，Tris提取液的浓度0.25mol/L，物料比1∶4。　　5.采用静态吸附和动态吸附相结合，比较筛选9种不同类型的离子交换树脂对MT分离提纯效果，并确定最佳纯化工艺。