目的:为牛舌草的质量标准制定提供理论依据,保证牛舌草的临床用药安全。方法:（1）对牛舌草及其混淆品的整体性状、解剖学特征、药材的粉末特征进行详细研究。（2）以芦丁和咖啡酸为对照,建立薄层鉴别方法,对牛舌草及其混淆品药材进行TLC比较研究。（3）对牛舌草和混淆品进行芦丁和咖啡酸的含量测定。（4）参照药典相关内容进行常规项目检查,包括水分、灰分和酸不溶性灰分、水溶性浸出物含量、醇溶性浸出物含量和有机氯农药残留检查。（5）对牛舌草及混淆品进行DNA物种鉴别,比对ITS2序列。结果:（1）粗毛牛舌草、琉璃苣来源有所区别,粗毛牛舌草叶基部紧靠茎生长,琉璃苣叶片叶柄明显,二者叶片厚度长度和主脉形状有差异;二者花的颜色形状大小有区别。干燥药材都有密被白色短刺的叶片和茎,但是粗毛牛舌草和未知牛舌草叶片性状有差异。根木栓层和韧皮部的宽度和叶片的横切面构造可以较为简便的区分出粗毛牛舌草和混淆品。粗毛牛舌草和混淆品粉末纤维比对中,并无发现明显有区别的鉴别特征。（2）含量测定:粗毛牛舌草芦丁含量在0.69-1.49 mg/g,咖啡酸含量范围在97.53-129μg/g;琉璃苣芦丁含量2.2 mg/g,咖啡酸含量146μg/g;未知牛舌草芦丁含量1.18 mg/g,咖啡酸含量104.27μg/g。（4）粗毛牛舌草平均含水量在9.14%-10.83%;琉璃苣水分含量为8.3%,未知牛舌草水分含量为10.79%。粗毛舌草平均水溶性浸出物含量在17.46%-26.28%;琉璃苣的水溶性浸出物含量为27.37%;未知牛舌草的水溶性浸出物为24.39%。粗毛舌草平均醇溶性浸出物含量在5.68%-8.77%范围内;琉璃苣的醇溶性浸出物含量为9.23%;未知牛舌草的醇溶性浸出物为8.00%。粗毛牛舌草的总灰分含量在9.82%-12.87%范围之间,琉璃苣的总灰分为9.46%,未知牛舌草的总灰分为12.58%。粗毛牛舌草的酸不溶性灰分含量1.23%-2.51%;琉璃苣酸不溶性灰分1.56%;未知牛舌草酸不溶性灰分2.73%。有机氯农药残留小于国家规定上限。（5）DNA分子鉴定表明,粗毛牛舌草单独为一种,琉璃苣单独为一种,牛舌草属其他植物均各自为一种,单系性良好,说明N-J聚类分析可以把牛舌草属植物进行物种区分。结论:（1）可以通过基原、显微构造进行牛舌草和混淆品的区分。（2）建立了牛舌草和混淆品的薄层色谱方法并进行了含量测定。（3）进行了常规项目检查,得出粗毛牛舌草的水分、灰分、浸出物范围。（4）通过ITS2序列比对可有效区分鉴定出牛舌草和混淆品。