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在长期与环境相互适应的过程中,卤虫进化形成了一套特殊的生殖模式:即在适宜的环境条件下,进行卵胎生,直接产生无节幼体;而在不适宜的环境下,进行卵生,产生休眠卵。这些休眠卵内部的细胞大都停滞在G1期,一旦休眠被打破,个体开始由原肠胚向无节幼体转变。在这个过程中,只有当休眠卵发育到一定时期后,内部细胞才开始分裂。目前,对于卤虫休眠卵的形成以及孵化过程中细胞周期的调控机制,尚未得到解析。本研究以卤虫的BRCA1相关蛋白1(BAP1)为研究对象,探索其在卤虫休眠卵形成以及休眠卵孵化过程中的相关功能。BAP1分子属于去泛素化酶家族中的泛素羧基端水解酶(UCH)亚类成员。去泛素化酶是在体内广泛存在的一大类酶的总称。它们通过水解与底物分子结合的泛素分子,与泛素依赖的蛋白降解途径相互协调,参与体内众多的生物学过程本研究首先解析了卤虫中BAP1分子的分子结构,证实其具有典型的UCH家族保守结构域。随后对BAP1在卤虫体内的表达特征进行了分析,结果显示,BAP1分子在长光照卤虫的各个体节及各发育时期表达基本保持恒定;但在短光照卤虫中,腹部的表达明显高于头胸部,且在双卵期和单卵期成虫的腹部表达量明显增高。与此同时,我们还研究了在休眠卵孵化过程中的BAP1分子的变化情况。结果表明,在休眠卵的孵化过程中,BAP1分子的表达水平呈现剧烈的变化。具体表现为,在孵化早期,BAP1分子只有痕量表达;进入到孵化中期,休眠卵内细胞即将结束细胞周期停滞进入有丝分裂时,BAP1分子突然出现大量的表达。为了研究BAP1分子在卤虫体内的生物学功能,我们以短光照双线期前的卤虫为研究对象,进行了BAP1dsRNA的干涉工作。结果发现,经过有效的干涉,短光照卤虫及其所产生的休眠卵外观没有明显变化,但是休眠卵细胞内的细胞周期特征性蛋白cyclinE水平下降,而cdc2 Tyr15磷酸化水平增高。此外,我们分别在肿瘤细胞和爪蟾及斑马鱼的胚胎中表达了BAP1蛋白。将带有EGFP标签的BAP1蛋白转染HeLa和A549细胞后,发现细胞收缩变圆,生长受到明显的抑制。与此同时,将BAP1mRNA注射入爪蟾的受精卵,观察发现BAP1蛋白的表达可引起爪蟾胚胎细胞的分裂异常,产生畸形个体。综上所述,我们在卤虫的休眠卵中克隆得到了一个BAP1分子,经序列比对证实其属于去泛素化酶家族中的泛素羧基端水解酶(UCH)亚类成员。卤虫BAP1分子在休眠卵内的缺失或在其它细胞中的过表达,都可以引起细胞周期的变化。我们认为卤虫BAP1分子参与调控细胞G1/S期的过程,参与了休眠卵的形成,协助维持了休眠卵细胞周期的停滞。这不仅为研究卤虫休眠卵的形成机制奠定了理论基础,也拓展了去泛素化酶的研究领域。