【摘 要】
：
目的:探讨C3G在卵巢癌恶性行为中的作用,并分析其可能的分子机制,为卵巢癌的治疗提供依据。方法:1设计合成三条针对C3G基因的shRNA片段和一条阴性对照shRNA片段,克隆到到空质
论文部分内容阅读
目的:探讨C3G在卵巢癌恶性行为中的作用,并分析其可能的分子机制,为卵巢癌的治疗提供依据。方法:1设计合成三条针对C3G基因的shRNA片段和一条阴性对照shRNA片段,克隆到到空质粒pSUPER.retro.neo/GFP上,分别转染进卵巢癌细胞株SKOV3中,Western blot检测C3G蛋白的表达,筛选出干扰效果较佳的两个质粒,并建立稳定转染细胞株。2用MTT、平板克隆形成实验、体外侵袭实验检测SKOV3细胞恶性表型,分别用明胶酶谱法和GST-pull down检测明胶酶活性及Rap1酶活性的变化,探讨可能调控卵巢癌恶性行为的分子机制。结果:1酶切鉴定及基因测序结果显示pSUPER.retro.neo/GFP -C3Gi1,-C3Gi2,及-C3Gi3重组质粒构建成功。Western blot结果显示:转染48小时后,和对照组相比,三个重组质粒中pSUPER.retro.neo/GFP- C3Gi2及-C3Gi3对C3G的抑制效果较好(P<0.05),抑制率分别为31%和69%,故我们用pSUPER.retro.neo/GFP-C3Gi2和-C3Gi3质粒成功建立了稳定转染细胞株。2敲低SKOV3细胞中内源性的C3G表达后,Rap1酶的活性明显减弱;癌细胞生长速度减慢、克隆形成率下降、细胞上清中明胶酶的产生明显受限、穿过人工基底膜的细胞数目明显减少。结论:我们的研究结果提示在卵巢癌细胞株SKOV3中鸟嘌呤核苷酸交换因子C3G通过激活Rap1酶活性从而促进细胞的增殖;同时可能通过促使癌细胞明胶酶的分泌促进卵巢癌细胞的侵袭和转移;而抑制C3G表达可能通过降低Rap1酶的活性达到逆转卵巢癌SKOV3细胞株的恶性行为的效应。
其他文献
目的:构建人转化生长因子-β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)的真核表达载体及对TGF-β1mRNA有抑制作用的TGF-β1短发夹RNA(shRNA)的表达质粒,再将两种重组质粒分
目的评价术后不同时机那屈肝素钙皮下注射对慢性高血压并发子痫前期血栓形成的影响。方法因慢性高血压并发子痫前期行剖宫产术患者36例，将其随机安排为两组：观察组与对照组，各18
<正> 李×,女,24岁。1989年12月30日诊。一年前分娩时即发现子宫下垂,未治。二周前人工流产手术后,子宫呈二度下垂。自觉有坠胀感,行走及劳累后加重,伴纳差、乏力、精神
转基因动物研究是目前生物科学的研究热点之一。家蚕是重要的经济昆虫，更是经典遗传学研究的模式生物之一。进行转基因蚕研究具有重要的理论意义和实用价值。转基因家蚕是指用
探究不同性别的原发性三叉神经痛(ITN)患者脑部功能活动变化的差异性。本研究实验组纳入31例ITN患者(男15例,女16例),健康对照组(HC)纳入33例(男16例,女17例)。所有被试者在
目的:探讨胃间质瘤中EGFR及Ki-67表达情况与间质瘤恶性程度的相关性,为胃间质瘤临床诊疗提供依据方法:胃间质瘤按核分裂数及肿瘤最大直径分组,用免疫组化方法,检测64例胃间质
目的研究SATB1,C-myc蛋白在肺鳞癌和腺癌组织中的表达和意义,并分析二者在肺癌预后中的价值。方法应用免疫组织化学S-P法检测60例肺鳞癌与腺癌组织和20例正常肺组织中SATB1和
<正> 今年四月,座落在上海南京西路的向阳儿童用品商店为探求儿童服装的市场趋势,把调进的近百个款式的儿童服装,统统以向阳店著名的“小银免”商标一式标牌,举办看样定货会
现代翻译科学的构筑：从乔姆斯基到奈达刘军平Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｐｒｅｓｅｎｔｐａｐｅｒｍａｋｅｓａｔｅｎｔａｔｉｖｅｓｔｕｄｙｉｎｔｏｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓｂｅｔｗｅｅｎＮｏａｍＣｈｏｍｓｋｙ＇ｓｌｉｎｇｕｉｓｔｉｃｔｈｅｏｒｙａｎｄＥ...
"夺取反腐败斗争压倒性胜利",重在治本。当前在警示教育上存在着贯彻落实习近平总书记和中央纪委相关指示部署不力、轻视忽视警示教育、缺乏针对性实效性感染力,把警示教育当