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目的 1.采用二次离心法在实验室制备兔富血小板血浆(Platelet Rich Plasma,PRP)并检测其血小板含量,研究不同浓度PRP对体外培养自体骨髓基质干细胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs)增殖的影响。2.应用可注射型纤维蛋白胶(Fibrin Glue,FG),自体PRP及体外培养的BMSCs以组织工程方法体外构建可注射型组织工程骨,观察种子细胞在材料中的生长情况,研究组织工程骨的超微结构特征。3.以动物自体PRP复合医用纤维蛋白胶构建出一种可注射型骨修复材料,单独应用这种材料或复合骨髓基质干细胞用于修复动物长管状骨骨缺损。以探讨自体PRP用于骨缺损修复的可行性,探索出一种以自体多种生长因子修复骨缺损的新途径,研制出一种新型的有生物活性因子的可注射型复合骨组织工程骨用于骨缺损的修复。 方法 第一部分 兔PRP的提取及其对BMSCs增殖的影响:抽取兔耳背中央动脉血,枸椽酸钠抗凝,分两次离心制备PRP,显微镜下计数其血小板并与全血比较;抽取兔髂骨骨髓,体外用全骨髓培养法培养兔BMSCs。PRP设五个不同浓度组(1%、5%、10%、20%、30%),与不加PRP的对照组比较,MTT法检测其对细胞增殖的影响。 第二部分 复合PRP的可注射型组织工程骨的构建:抽取兔髂骨骨髓,体外以全骨髓培养法培养BMSCs并用条件培养基(含10%胎牛血清,50ug/ml抗坏血