【摘 要】
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目的:我们通过检测淫羊藿素(Icaritin,ICT)对6-羟基多巴胺(6-Hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的MN9D细胞中线粒体损伤的变化,探讨ICT对6-OHDA诱导的MN9D细胞损伤模型的保护作用及可能机制。方法:选择MN9D(DA能神经元细胞株)细胞进行复苏及培养,选取生长良好的处于对数期MN9D细胞,将其随机分为对照组、0.01μM ICT组、50μM 6-OHDA组、
【基金项目】
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遵义市科技局课题:遵市科合HZ字(2021)304号; 遵义市科技局课题:遵市科合HZ字(2020)108号; 贵州省教育厅课题:黔教合KY字[2021]225
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目的:我们通过检测淫羊藿素(Icaritin,ICT)对6-羟基多巴胺(6-Hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的MN9D细胞中线粒体损伤的变化,探讨ICT对6-OHDA诱导的MN9D细胞损伤模型的保护作用及可能机制。方法:选择MN9D(DA能神经元细胞株)细胞进行复苏及培养,选取生长良好的处于对数期MN9D细胞,将其随机分为对照组、0.01μM ICT组、50μM 6-OHDA组、50μM 6-OHDA+0.001μM ICT组和50μM 6-OHDA+0.01μM ICT组。根据本课题组前期实验结果,给予相应浓度ICT预处理1小时后,加入6-OHDA共同处理24小时,通过ATP检测试剂盒检测ATP含量、线粒体复合物Ⅰ活性检测试剂盒检测线粒体复合物Ⅰ活性、流式细胞仪测定MMP的变化;蛋白免疫印迹法检测α-Syn、TH及Cyt C蛋白量;使用透射电镜观察各组线粒体形态变化情况。结果:与对照组比较,6-OHDA组ATP含量、线粒体复合物Ⅰ活性、MMP水平及TH蛋白量降低,α-Syn及Cyt C蛋白量升高,在电镜下可以观察到6-OHDA组细胞线粒体明显肿胀、线粒体嵴断裂、消失、电子密度降低,部分线粒体空泡化、膜破损;经ICT处理后,其ATP含量、线粒体复合物Ⅰ含量、MMP水平及TH蛋白量升高,α-Syn和Cyt C蛋白量明显降低,在电镜下可以观察到,线粒体肿胀程度减轻,少部分线粒体嵴尚清晰可见。结论:ICT对6-OHDA诱导的MN9D细胞损伤具有保护作用,该保护作用可能与提高线粒体复合物Ⅰ活性、提高ATP含量、稳定线粒体膜电位、进而减轻线粒体损伤相关。
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