人参愈伤组织无性系培养条件优化及次生代谢调控研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 15次 | 上传用户:sunplusit
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本实验研究以人参芽胞、实生苗的根、茎、叶为外植体进行愈伤组织诱导试验。结果表明,各种不同外植体在相同诱导条件下均能诱导出愈伤组织,且诱导率相差不大。选取2.4-D、NAA、BA、KT四种植物生长调节物质,采用单独使用和配合使用两种方法,分析比较了各因素在愈伤组织诱导中的作用大小及同一物质不同浓度间的差别,通过正交设计筛选出了诱导人参愈伤组织的最佳生长调节物质组合为MS+2.4-D 4mg·L-1+BA 1.5mg·L-1。 优化了人参愈伤组织无性系的培养条件。在培养基方面,主要进行了培养基类型、碳源、氮源及植物生长调节物质对培养物影响的研究,筛选出以改良MS培养基为基本培养基,添加3%蔗糖、1650mg·L-1NH4NO3、4mg·L-12.4-D、0.5mg·L-1BA的最佳培养基。在此基础上,进一步研究了培养基pH值、接种量、温度、光照对培养物生长、皂苷含量及皂苷产量的影响,确定了接种量为2-4克/瓶、pH值为6.0、温度为22℃、黑暗的培养条件,最有利于人参愈伤组织生长及皂苷合成。另外,确定了芽诱导的最佳培养基为MS+BA 1mg·L-1+KT 1.5mg·L-1。 以水杨酸为诱导子,观察其对人参培养物次生代谢的影响。选择出了水杨酸最佳添加浓度为10-3mg·L-1,最适添加时期为接种后的第28天,以这种方式处理后的人参愈伤组织皂苷含量和皂苷产量分别比对照提高了34%和64%。同时,跟踪测量了水杨酸加入后一定时期内,细胞中多糖、过氧化物酶、苯丙氨酸解胺酶及多酚氧化酶的变化情况。结果表明,多糖在水杨酸加入48h后达到峰值1.67%,比对照高50.5%。过氧化物酶在水杨酸加入后一直上升较快,到24h时活力最强,随后减弱,但也高于对照。苯丙氨酸解胺酶在加入水杨酸后,活力出现了两次峰值,在48h时达到最高,比对照高6.1%;84h为第二峰值,比对照高18.9%。多酚氧化酶72h达到活力最高值。
其他文献
本文主要研究10份不同棉花品种(系)的航天诱变敏感性及敏感材料的稳定性,10份材料,包括5份春棉(含2份海岛棉),5份短季棉,通过“实践八号”育种卫星搭载,调查各航天诱变材料及其地面对照的株高、果枝数、铃数、成铃数、突变率等性状,统计各航天诱变材料籽棉、皮棉产量、单铃重、衣分,并检测各航天诱变材料的纤维品质,综合分析比较不同类型的棉花材料对航天诱变的敏感性,初步探讨棉花航天诱变机理。主要研究结果如