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固有无序蛋白是一类存在多种动态互变结构，具有正常的生物学活性的蛋白质。在分子调控网络中，固有无序蛋白通过与多种分子结合，引入复杂的多样性互作，进而在植物适应逆境和胁迫应答方面起到重要作用。MsZFP是一种转录因子具有手指状结构域，通过生物信息学预测其为固有无序蛋白，在细胞分化、基因表达调控、胚胎发育、增强植物胁迫的耐受性等方面具有重要作用。本研究从紫花苜蓿（Medicago sativa L）中克隆得到MsZFP基因，对烟草进行遗传转化，为MsZFP基因功能及紫花苜蓿抗逆机理的研究奠定基础。主要研究结果如下： 1. MsZFP基因的克隆与序列分析 通过RT-PCR方法克隆了MsZFP基因，该基因含有762 bp的开放读码框，编码253个氨基酸。具有2个保守的单C2H2型结构域。对其开放读码框氨基酸进行无序性分析，发现其为固有无序蛋白。通过与其它物种中MsZFP近源基因的比对及进化树构建发现，紫花苜蓿MsZFP基因与蒺藜苜蓿、大豆、花生等物种中近源基因的亲缘关系较近。 2. pCBM-MsZFP植物表达载体的构建 构建了含有MsZFP基因的植物表达载体pCBM-35S-MsZFP，含有草丁膦筛选标记基因PPT和组成型启动子35S。 3. MsZFP基因对烟草的遗传转化 通过农杆菌介导法将MsZFP基因转入烟草,获得43株PPT抗性植株。对植株基因组DNA进行PCR鉴定，获得25株阳性植株。通过实时定量PCR对阳性植株基因表达量进行检测，结果表明，转基因株系OX3、OX15、OX23中MsZFP的表达量比较高。 4.对转基因烟草的抗逆性分析 将野生型（WT）和转基因烟草置于-4℃处理2 h，观察到WT叶片明显萎蔫，其相对电导率明显高于转基因烟草。在0℃低温胁迫处理下，转基因烟草的丙二醛含量明显低于WT，脯氨酸、可溶性蛋白含量明显高于WT。表明MsZFP基因可以提高植物的耐寒能力。 将WT和转基因烟草相同部位叶圆片浸泡于300 mM NaCl溶液，7天后转基因烟草仍保持绿色而WT明显失绿，转基因烟草的叶绿素含量明显高于WT，表明MsZFP基因可提高植物对盐胁迫的耐受性。