低剂量甲醛对细胞的增殖效应和高剂量甲醛诱导细胞凋亡的研究

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甲醛(formaldehyde,FA)是一种常见的装修型化学性室内空气污染物,也是一种内源性有机化合物。它以其来源广、毒性大、污染水平高、污染时间长等特点,已成为我国最主要也是污染最严重的室内空气污染物之一。室内空气甲醛对人体健康的影响涉及:呼吸道和眼部刺激作用、致敏作用和免疫毒性、遗传毒性和癌症、肺功能损害、神经行为改变等诸多方面。这些健康影响都是在高剂量甲醛作用下的结果。然而,低剂量的甲醛到底有什么样的作用呢,这么多年研究相对比较少,据知,低剂量的甲醛能诱导适应性反应。为了探讨低浓度甲醛的细胞增殖效应,本研究以HEK293细胞为研究对象,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和流式细胞仪检测了HEK293细胞的增殖情况。细胞凋亡是当今生命科学领域的研究热点之一,国内外关于甲醛在细胞凋亡中的诱导作用已有不少报导,然而对其诱导凋亡机制的研究也大多限于推测,对其诱导凋亡的真实性还需要有大量实验证据来证明,为了探讨甲醛能否诱导细胞凋亡的真实性及其相关机制,本研究以Hela细胞为研究对象,通过形态学观察、MTT实验和流式细胞仪检测了Hela细胞凋亡情况。研究结果如下:1.低浓度甲醛的细胞增殖效应适应性反应(adaptive response,AR)是生物界普遍存在的现象。过去对一些烷化剂诱导适应性反应的研究早有报道,目前仍吸引着许多实验室的关注。低剂量的甲醛能诱导适应性反应,它对体内很多酶起到保护作用,对细胞的生长状态也有一定的影响。本研究以HEK293细胞为研究对象,应用MTT实验和流式细胞仪检测HEK293细胞的增殖和细胞周期。研究结果显示:用60μmol/L甲醛处理HEK293细胞12h后,G1期细胞百分比(28.4%)较对照组(37.0%)减少了8.6%,而S期细胞百分比(48.5%)较对照组(40.7%)增加了7.8%;用120μmol/L甲醛处理HEK293细胞12h后,G1期细胞百分比(38.1%)较对照组(37.0%)增加了1.1%,而S期细胞百分比(40.2%)较对照组(40.7%)减少了0.5%。这表明了低浓度甲醛促进HEK293细胞的增殖;较高浓度甲醛抑制HEK293细胞的增殖。2.甲醛所致细胞凋亡的研究细胞凋亡是当今环境毒理学领域的研究热点之一。为了探讨甲醛能否诱导细胞凋亡,本研究以Hela细胞为实验材料,通过不同浓度的甲醛处理24h后,应用形态学观察、MTT实验和流式细胞仪检测了Hela细胞凋亡情况。实验结果表明低浓度甲醛(≤0.2mmol/L)处理Hela细胞24h后,对细胞生长有显著的抑制作用(p<0.05),但对细胞形态改变不大,且对细胞核DNA没有损伤,而高浓度甲醛(≥0.4mmol/L)处理Hela细胞24h后,对细胞生长有极显著的抑制作用(p<0.01),细胞形态逐渐变的模糊不清,并有少量细胞萎缩成圆形,且会造成细胞核DNA有规律的断裂,细胞凋亡率随甲醛浓度的增加而增大。以上实验结果显示了高浓度甲醛处理Hela细胞24h后,会诱导细胞凋亡;并且随甲醛浓度的升高凋亡率逐渐增大,呈一定的剂量——效应关系。
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