缬沙坦对糖尿病大鼠视网膜内皮素-1 表达的影响及其机制的研究

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目的糖尿病视网膜病变是糖尿病严重并发症之一,其高发病率、致盲率严重威胁着人类的生存质量,受到当今医学界的高度重视。大量研究认为血管活性多肽内皮素(Endothelin,ET)在糖尿病视网膜病变中起着重要的作用,是影响糖尿病视网膜病变视网膜血流动力学的血管活性物质之一。本研究通过对糖尿病大鼠给予血管紧张素Ⅱ受体AT1拮抗剂缬沙坦(Valsartan)治疗,来观察大鼠视网膜内皮素-1(ET-1)表达的变化,探讨抑制肾素血管紧张素系统(rennin-angitensin system,RAS)对糖尿病视网膜病变的治疗作用。方法选取115只12周龄,体重180-220g的健康雄性Wistar大鼠,适应性喂养3天后,将其随机分为三组:空白对照组、对照组、实验组。其中对照组、实验组大鼠禁食12小时后采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)单次腹腔注射诱发糖尿病大鼠模型;而空白对照组禁食后注射等量柠檬酸缓冲液。模型建立后,实验组予缬沙坦按24mg/(kg·d)灌胃,其余两组每日予等体积蒸馏水灌胃。所有大鼠标准饲料喂养,分别于干预后2周、4周、6周各组随机选取10只大鼠,麻醉后取眼球,利用ADP酶组织化学染色方法进行视网膜铺片,了解视网膜血管分布;利用免疫组织化学方法半定量检测视网膜ET-1表达情况。统计学分析:所有实验数据以均数±标准差([x]±s)表示,采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。多组间样本均数比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA),组间两两比较采用Student-NewMan-Keuls检验。检验水准a=0.05,P<0.05认为差异有统计学意义。结果1、实验前,各组大鼠体重、血糖无明显差异(P>0.05)。实验期间实验组及对照组大鼠体重明显低于空白对照组(P<0.05);4,6周对照组大鼠体重明显低于同期实验组,统计学上具有显著差异(P<0.05);对照组及实验组大鼠血糖明显高于空白对照组,统计学上具有显著差异(P<0.05),而两组之间并无明显差异(P<0.05)。2、ADP酶组织化学染色显示:正常大鼠视网膜自视盘发出的大血管呈放射状向四周分布,毛细血管分布均匀,管径粗细均一;对照组6周大鼠视网膜周边血管走形迂曲。实验组6周大鼠视网膜血管走形未见明显异常。3、免疫组织化学染色显示:正常大鼠视网膜即存在少量的ET-1表达,对照组随病程进展ET-1表达逐渐增强,且于4,6周时明显高于空白对照组,具有显著差异(P<0.05)。实验组大鼠视网膜ET-1表达在4,6周时较空白对照组增强,但显著低于同期对照组,具有显著差异(P<0.05)。结论1、正常大鼠视网膜存在少量的ET-1表达。2、随着糖尿病病程进展,大鼠视网膜ET-1表达逐渐增强。3、血管紧张素受体拮抗剂缬沙坦能够降低糖尿病大鼠视网膜ET-1的表达,对糖尿病视网膜病变起治疗或延缓作用。
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