洋葱同源四倍体的诱导和鉴定

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洋葱(Allium cepaL.)为百合科、葱属二年生草本植物,为典型的异花授粉作物。常规育种方法育种周期长、工作量大、育种效率低。而多倍体育种能快速提高洋葱品质、抗性、产量等。洋葱高频离体再生体系的建立为洋葱多倍体的离体诱导奠定基础。活体诱导方法也在其他葱属植物上有所应用。因此本试验探讨在洋葱高频离体再生体系的基础上诱导四倍体植株;秋水仙素注射洋葱活体花苞诱导洋葱同源四倍体植株;种子浸泡秋水仙素诱导洋葱同源四倍体植株。采用目前诱导多倍体常用的方法来探讨诱导洋葱同源四倍体的最佳方案,从而缩短洋葱育种时间,提高育种效率,旨在为创新洋葱种质提供理论依据和技术方法。以二倍体黄皮洋葱品种‘W433’为试验材料。取休眠后的鳞茎为外植体在离体条件下接种到含不同浓度秋水仙素的固体与液体BDS培养基上诱导洋葱同源四倍体。采用形态鉴别、叶片气孔大小比对和根尖压片染色体计数等方法进行染色体倍性鉴定。其中固体BDS培养基诱导结果显示0.02%秋水仙素处理24 h四倍体诱导效果最佳,处理的300个离体鳞茎中最终有8株成功鉴定为四倍体幼苗。液体BDS培养基诱导结果显示0.01%秋水仙素处理24 h与36 h四倍体诱导效果最佳,处理的300个离体鳞茎中分别有11株与16株四倍体幼苗。总的情况看,液体BDS培养基的诱导效果要优于固体BDS培养基,但液体培养基处理的离体鳞茎玻璃化、感染率与死亡率较高。种子浸泡于不同秋水仙素中不同时间诱导洋葱同源四倍体植株。将不同浓度秋水仙素注射到洋葱花苞上不同次数诱导洋葱花粉变异从而产生洋葱同源四倍体种质资源。将采用形态鉴别、叶片气孔大小比对进行倍性鉴定。种子浸泡秋水仙素诱导四倍体试验中0.15%的秋水仙素浸泡种子72 h的诱导效果最好。通过叶片气孔鉴定有1株幼苗为可能是四倍体植株。花苞注射诱导试验中0.1%的秋水仙素注射一次与二次的花粉变异诱导效果最好,分别有5株与6株植株的花粉变异且收获了变异种子。种子播种后发芽率统计显示浓度越低出苗率越高,但诱导率总体偏低。
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