与食管鳞癌发生发展相关的多种蛋白表达分析

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[目的] 观察对比多种蛋白在食管鳞癌组织、癌前病变和正常食管粘膜及食管鳞癌细胞系的表达情况,分析其与食管鳞癌发生发展的相关性。 [方法] (1)将不同pTNM分期的205例食管鳞癌组织及不同程度癌前病变和正常食管粘膜组合排列构建组织芯片,用免疫组化方法检测基因芯片mRNA水平差异表达的标志物(Fas、FADD、caspase 8、CDC25B、fascin、CK14、CK4、annexin 1、laminin-5γ2和SPARC)以及突变型p53在不同阶段病变中蛋白水平上的表达差异。并分析在浸润癌中的表达与浸润深度、淋巴结转移和分化程度等的关系。(2)用Western blot方法检测fasein、CK14、laminin-5γ2在食管鳞癌细胞系EC9706、TE12、COLO-680N、KYSE510、KYSE450、KYSE410、KYSE180、KYSE150、KYSE140、KYSE70、KYSE30、YES2中的表达差异。 [结果] (1)食管鳞癌及癌前病变中突变型p53蛋白积聚;FADD、CDC25B、fascin、CK14、laminin-5γ2、SPARC表达上调,而Fas、caspase 8、CK4、armexin 1表达下调,与mRNA水平研究一致。这些分子异常可分为“早期事件”:在轻度和中度不典型增生,突变型p53、FADD、CDC25B、fascin高表达或Fas、caspase 8、CK4、annexin 1表达下降;“中期改变”:在重度不典型增生和原位癌,CK14高表达和FADD进一步增高;发生浸润和/或转移时的蛋白表达差异-“晚期
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