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本研究的目的旨在探讨MCP-1在胰腺癌基因治疗中的应用价值,尝试为胰腺癌的治疗提供一种新的可供选择的治疗手段。为此,我们采用腺病毒载体,把人MCP-1基因同源重组到载体上并制备出复制缺陷型重组MCP-1腺病毒;建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过瘤内注射腺病毒以感染胰腺癌细胞使其表达并分泌一定水平的MCP-1,观察MCP-1对胰腺癌肿瘤生长的作用并探讨效应产生的机理,为临床应用MCP-1基因治疗胰腺癌奠定基础。
利用AdEasyTM系统构建重组MCP-1腺病毒载体并制备复制缺陷型重组MCP-1腺病毒。成功克隆出人MCP-1基因cDNA片段,大小为383bp,测序后Blast分析证实为人MCP-1的编码区序列。结论表明了AdEasyTM系统利用细菌内高度有效的同源重组机制和抗生素抗性筛选的特性。
建立胰腺癌SW1990裸鼠移植瘤模型,通过瘤内注射腺病毒Ad-MCP-1,观察体内条件下感染胰腺癌细胞的情况以及MCP-1对肿瘤生长的影响,并探讨其作用机制。
结论表明了MCP-1在胰腺癌肿瘤微环境中的高水平表达能够抑制肿瘤的生长,其抑制作用可能与单核巨噬细胞在胰腺癌组织中的浸润有关,其机制可能是通过单核巨噬细胞介导的细胞毒作用和凋亡的诱导发挥抑制作用。