论文部分内容阅读
桃树根癌病是一种危害严重的细菌性病害,防治十分困难。生物防治是目前国内外植物病害防治的重要手段和发展方向,植物病害的生物防治要基于生防菌的分离,如何从自然界数量庞大的微生物群体中筛选到有效的生防菌株是生物防治的重要基础,也是评价生物防治效果的前提。本试验首先对桃树根癌病细菌进行了分离和鉴定,接着又从土壤中分离出一系列细菌、真菌及放线菌菌株,通过与病原细菌进行相应的平板对峙试验,筛选出对根癌病菌有明显拮抗作用的菌株,最后将筛选获得的拮抗菌株在指示植株上进行了初步的病害防治试验。主要研究结果如下:从桃树根瘤中分离出20株具有土壤杆菌菌落特征的分离物,通过培养性状、染色镜检观察和16S r DNA分子鉴定初步确定了其中的A-4菌株为根癌土壤杆菌,生理生化鉴定及BIOLOG鉴定又进一步确定A-4菌株为根癌土壤杆菌生物型II型。通过分子生物学、向日葵幼苗和桃树幼苗接种等试验,确定A-4菌株含有Ti质粒,具有较强致病性,可以导致向日葵和桃树产生根癌。从感病植株根际土样和健康植株根际土样中共分离得到细菌21株、真菌9株、放线菌33株,采用琼脂扩散法测定了它们对桃树根癌病菌A-4菌株的抑制作用,又将这些菌株的发酵滤液对A-4菌株的抑菌能力进行了测定。结果获得对桃树根癌病菌A-4菌株具有明显拮抗活性的细菌菌株6株,其中菌株H-B-1抑菌效果最好,其抑菌活性显著优于其它菌株的抑菌能力,菌株S-B-10次之。用细菌的发酵滤液进行抑菌试验,结果表明6株细菌的发酵滤液对桃树根癌病菌A-4菌株均具有较强的抑菌活性。9株真菌对病原菌A-4菌株均不表现拮抗作用。33株放线菌中有4个菌株对A-4菌株表现出一定的拮抗能力,其中菌株H-A-6抑菌效果最好,菌株H-A-4次之。用放线菌的发酵滤液进行抑菌试验,结果表明菌株H-A-4、菌株H-A-6和菌株S-A-12对病原菌表现出较强的抑菌活性。与6株土壤细菌的抑菌能力相比,放线菌菌株的抑菌能力稍弱。平板对峙试验结果表明6株土壤细菌作为生防菌表现出了明显的优势,通过16S r DNA分子鉴定初步确定了6株土壤细菌均为Bacillus属细菌,故本研究选择其作为拮抗菌株应用于温室指示苗的初步防治试验。以番茄幼苗为指示植物,通过针刺接种番茄幼苗评价拮抗微生物对指示植物的抗病促生作用,结果发现菌株H-B-7既能防治根癌病的发生,也可以促进植株的生长;菌株S-B-7、菌株S-B-6对病原菌均有较强的抵抗力;菌株S-B-10、菌株H-B-1抵抗病原菌的能力稍弱,但其促进寄主植株生长的能力较强。