薯蓣皂素是生产激素类药物的重要基础材料。盾叶薯蓣是世界上含薯蓣皂素最高的物种,其薯蓣皂苷脱糖后得到薯蓣皂素。工业上生产薯蓣皂素通常用酸水解盾叶薯蓣,对环境污染严重,酶法转化薯蓣皂素是一种环境友好的转换方法,但国内相关研究不足,用纤维素酶和蜗牛酶复配转化的方法更是未见报道,这2种酶均属于复合酶,水解能力相当于多种酶共同作用,而且价格偏低,适合应用于工业生产。本研究利用超声细胞破碎技术前处理盾叶薯蓣再进行纤维素酶和蜗牛酶复配水解,与传统酸解法进行比较,先后优化了超声细胞破碎以及复配酶解工艺,再确定液相色谱定量检测薯蓣皂素的条件,提出一种环保低碳的制备以及检测薯蓣皂素的方法。主要结论如下:1、超声细胞粉碎技术辅助酸解法提取薯蓣皂素:在单因素实验的基础上,对超声波破碎工艺进行优化,各因素对薯蓣皂素得率的影响大小顺序为:超声温度>超声功率>超声时间,最佳工艺是:提取功率570 W,提取时间45 min,温度70℃,验证实验取得薯蓣皂素的产率为0.8802%,比乙醇热回流提取提高了19.28%,比直接酸解提取提高了30%。2、采用纤维素酶和蜗牛酶复配水解的方法制备薯蓣皂素。在确定了操作中的关键步骤和单因素实验后,对酶解工艺进行优化,各因素对薯蓣皂素得率的影响顺序为:酶解温度>酶添加量>酶解时间>酶解pH,最佳组合是酶解48 h,酶添加量为物料的8%,酶解pH为6.0,水解温度为50℃,验证实验取得的薯蓣皂素的产率为0.5249%。3、超声破碎辅助复配酶解法,比直接酶解法提高了25%,产率与传统酸解法基本一致,全程不需要消耗乙醇和酸,是一种高效低能、经济又环保的制备薯蓣皂素的方法。4、确定了水解结束后的最佳萃取条件:采用90-120℃的石油醚于90℃水浴锅中萃取6 h。5、建立了高效液相色谱法对薯蓣皂素进行定性和定量的色谱条件:采用WondaSil C18(5μm 4.6*150 mm)色谱柱,紫外波长203 nm,流动相为80%乙腈。该方法在4.70μg/mL~940μg/mL范围内线性良好。精密度、稳定性、重复性和加标回收率实验的相对标准偏差都在误差范围内。