PLGA微球载NGF联合超声对视神经节细胞的保护作用

来源 :重庆医科大学 重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:my_sunday_tongxing
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目的:探讨乳酸-羟基乙酸共聚物(ploy(lactic-co-glycolicacid),PLGA)微球联合神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对视神经损伤大鼠视神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的保护作用。方法:PLGA为原料制备包载有NGF的PLGA微球。检测载药微球的载药量和包封率,观测其形态特点以及粒径分布。将Sprague-Dawley(SD)雄性成年大鼠69只随机分为5个组,正常组(A组)和假手术组(B组)各9只大鼠,生理盐水注射组(C组)、神经生长因子注射组(D组)、PLGA微球联合NGF注射组(E组)各17只大鼠,B~E组大鼠均行超声辐照处理。各组分别于0.5d、1d、3d、7d取样行视网膜切片免疫组化染色和和苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE),观察视网膜上葡萄糖钙调蛋白(glucose regulated protein78kDa,GRP78)表达和组织病理的变化,并采用荧光金(fluorogold,FG)逆行标记视神经节细胞于视神经钳夹损伤造模后第7d取样计数各组RGCs数量。结果:PLGA载药微球包封率68.4%,载药量0.0323%,体外7d的累计释放率82.6%,微球粒径3.17±0.6μ m。FG逆行标记RGCs计数五组间差异显著,有统计学意义(F=65.858,P=0.000),A组与B组间差异无统计学意义(P=0.862>0.05),其它各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色A、B组未见阳性细胞,RGCs的GRP78阳性细胞率显示,C~E组不同时间各组间差异有统计学意义(F组别=184.330,P组别=0.000),各组在各时间点间差异亦有统计学意义(F时间=21.472,P时间=0.000)。HE染色提示第7d时E组视网膜水肿较C、D组减轻。结论:1、NGF-PLGA微球联合超声治疗视神经损伤大鼠能提高对RGCs的保护作用2、NGF可通过干预内质网应激诱导的细胞凋亡途径减少RGCs凋亡
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