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目的：应用改良的四血管阻断法制备Wistar大鼠全脑缺血再灌注模型，在全脑缺血前腹腔注射PTEN(the phosphates and tensin homologuedeleted on chromosome10,第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因)的抑制剂bpv(pic)抑制其活性，并采用鼻咽腔降温法实施头部浅低温，观察再灌注期大鼠海马CA1区P-PTEN(磷酸化PTEN)蛋白、Bax蛋白和Bcl-2蛋白的表达，检测脑组织中S100B蛋白浓度、丙二醛（MDA）的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性，研究PTEN活性的抑制、头部浅低温以及PTEN活性的抑制联合头部浅低温对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响，并探讨对其影响的可能机制。方法：1实验分组及动物模型制备清结级健康雄性Wistar大鼠60只，体重250~280g,由河北医科大学实验动物中心提供。采用随机数字表法将实验大鼠随机分为5组(n=12):假手术组(S组)、全脑缺血再灌注组（IR组）、bpv(pic)抑制PTEN活性组（B组）、浅低温组（MH组）和PTEN活性的抑制联合头部浅低温组（MB组）。应用改良的Pulsinelli四血管阻断法制备大鼠全脑缺血再灌注模型，全脑缺血时间为15min，再灌注8h。大鼠称重后腹腔注射10%水合氯醛（350mg/kg）,麻醉后固定在实验台上，在颈后正中第一、二颈椎处切开颈后正中皮肤,分离肌层并暴露双侧翼状孔外口,烧灼双侧的椎动脉使其永久闭塞。24h以后给大鼠再次麻醉，进行气管插管并吸入氧气。尾静脉置管后，静脉泵入乳酸钠林格氏液。颈前正中切开皮肤，分离双侧颈总动脉，穿线备用。大鼠立体固定后，监测脑电图、心电图和直肠温度。在大鼠躯干下放置小热水袋，躯干上空放置60瓦白炽灯，通过更换热水袋并调节躯干与白炽灯的高度使实验大鼠的直肠温始终维持在（37.0±0.5）℃。实验中的S组大鼠仅暴露翼状孔外口，并分离颈总动脉，但不烧闭双侧椎动脉，不夹闭双侧颈总动脉，观察8小时。B组制备大鼠全脑缺血再灌注模型，并在全脑缺血前腹腔注射bpv(pic)，剂量为每次20μg/100g，给药4次，间隔3小时，最后一次给药后20min夹闭双侧颈总动脉。IR组制备大鼠全脑缺血再灌注模型，并在全脑缺血前腹腔注射与bpv(pic)等容量的0.9%氯化钠溶液。MH组和MB组均制备全脑缺血再灌注模型，气管插管后在咽喉下放入吸痰管和棉球，防止误吸。用微型颅骨钻在右侧海马CA1区（前囟后3.6mm、中线右侧旁开3mm和皮层下2mm）钻开一直径约2mm的圆孔，置入微型温度探头监测海马温度，在全脑缺血前经双侧鼻腔置入20G硅胶管,深度为5mm，灌注5℃0.9%氯化钠溶液，实施头部浅低温，速度为100ml·min-1·kg-1，待海马温度降至（33.0±0.5）℃后，夹闭双侧颈总动脉15min，低温维持1h后自然复温。实验中直肠温始终维持在（37.0±0.5）℃。MB组在全脑缺血前腹腔注射bpv(pic)（剂量与用法同B组），并在全脑缺血前实施头部浅低温，MH组除实施头部浅低温外，在全脑缺血前腹腔注射与bpv(pic)等容量的0.9%氯化钠溶液。2标本的采集及检测方法2.1海马CA1区免疫组化法测定P-PTEN蛋白、Bax蛋白和Bcl-2蛋白的表达假手术组观察8h,其它组再灌注8h后，每组随机取6只大鼠，麻醉后，用4%多聚甲醛溶液经心灌流固定，取脑后放入4%多聚甲醛溶液中进行后固定，置4℃冰箱中保存，用于免疫组织化学染色。2.2脑组织中S100B蛋白、MDA含量和SOD活性的检测每组取另外6只大鼠，麻醉后，快速断头取出脑组织，放入冷冻管冻存于液氮中，然后移入-70℃的冰箱中保存。用ELISA法测定S100B蛋白的含量，用硫代巴比妥酸法测定MDA的含量，用黄嘌呤氧化酶法测定SOD的活性，按试剂盒的具体说明进行操作。结果：1五组间大鼠的体重比较差异无统计学意义（P>0.05）。2海马CA1区P-PTEN蛋白表达（IHS）的比较与S组相比较，IR组P-PTEN蛋白表达减少，MB组P-PTEN蛋白表达增加，差异有统计学意义（P<0.05）。与IR组相比较，B组，MH组和MB组P-PTEN蛋白表达均增多，差异有统计学意义（P<0.05）。与B组或与MH组相比较，MB组P-PTEN蛋白表达均增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。S组、B组和MH组三组间两两比较差异均无统计学意义（P>0.05）。3海马CA1区Bax蛋白（IHS）、Bcl-2蛋白（IHS）和Bcl-2/Bax比值的比较与S组相比较，其它四组Bax蛋白表达均增多；B组、MH组和MB组Bcl-2蛋白表达均增多；IR组Bcl-2/Bax比值降低，MH组和MB组Bcl-2/Bax比值增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与IR组相比较，B组、MH组和MB组Bax蛋白表达均减少；B组、MH组和MB组Bcl-2蛋白表达均增加，Bcl-2/Bax比值均增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与B组相比较，MB组Bax蛋白表达减少；MH组和MB组Bcl-2蛋白表达均增加，Bcl-2/Bax比值均增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与MH组相比较，MB组Bax蛋白表达减少，Bcl-2蛋白表达增加，Bcl-2/Bax比值增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。其余组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。4脑组织中S100B蛋白的比较与S组相比较，IR组、B组和MH组S100B蛋白含量均增多，差异均有统计学意义（P<0.05）。与IR组相比较，B组、MH组和MB组S100B蛋白含量均减少，差异有统计学意义（P<0.05）。与B组或与MH组相比较，MB组S100B蛋白含量均减少，差异有统计学意义（P<0.05）。S组和MB组、B组和MH组的比较差异均无统计学意义（P>0.05）。5脑组织中MDA含量和SOD活性的比较与S组相比较，IR组和MH组MDA含量均增多；其它四组SOD的活性均降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。与IR组相比较，B组、MH组和MB组MDA含量减少；MH组和MB组SOD活性增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与B组相比较，MB组MDA含量减少；MH组和MB组SOD活性增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与MH组相比较，MB组MDA含量减少，SOD活性增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。其余组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：1PTEN活性的抑制、头部浅低温以及PTEN活性的抑制联合头部浅低温均能够减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤，具有神经保护作用。2PTEN活性的抑制联合头部浅低温比各自单独应用对大鼠全脑缺血再灌注损伤的神经保护效果增强。3以上影响机制可能与神经元凋亡的抑制和活性氧生成的减少有关。