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目的:为了保证T淋巴细胞亚群分析结果的可比性和可靠性,各临床实验室必须开展室内质量控制,并参加室间质量评价活动。这些质量保证措施的开展均需要合格的T淋巴细胞亚群分析全血质控物,但是目前无国产的T淋巴细胞亚群分析全血质控物,质控物的提供主要依赖于国外生产商(如Beckman Coulter公司、BD公司),进口质控物价格昂贵、购买周期长,给各临床实验室和室间质量评价组织机构的应用带来较大困难。为此,卫生部临床检验中心参考大量国内外文献研制了T淋巴细胞亚群分析的全血质控物。方法:首先在研制T淋巴细胞亚群分析全血质控物的过程中,对多种影响因素进行了研究和分析,选择最佳方案,制备了批号分别为20081027、20081111和20090402的T淋巴细胞亚群分析全血质控物。依据CNAS-GL03《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》及ISO Guide 35《标准物质/标准样品的定值—通用原则和统计原理》,每个批号随机抽取10支样本,每支样本按照随机顺序重复检测2次,对三个批号的自制质控物CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+淋巴细胞百分比三个指标的均匀性进行评价,对检测结果进行单因素方差分析并计算均匀性的不确定度;按照不同的时间间隔随机抽取有足够代表性的样本,对20081027和20081111批号自制质控物的三个指标的稳定性进行评价,包括不同储存温度对质控物检测结果的影响、开盖稳定性及长期稳定性的评价,对检测结果进行一元线性回归分析并计算长期稳定性的不确定度;同时平行检测进口质控物作为对照。使用型号为Coulter-EPICS XL、BD-FACSCaliber的流式细胞仪各2台分别检测批号为20081027和20081111的自制质控物,并使用型号为Coulter-EPICSXL、Coulter-Cytomics FC500、BD-FACSCaliber、BD-FACSCanto的流式细胞仪各1台分别检测批号为20090402的自制质控物及进口质控物,以观察自制质控物不同型号流式细胞仪的适用性;使用批号为20081027和20081111的自制质控物与进口质控物同时试用于Coulter-EPICS XL机型流式细胞仪的室内质量控制;并发放批号为20081027和20081111的自制质控物(编号为200806、200807)进行室间质量评价调查,将调查结果与进口质控物(编号为200801～200805)进行分析比较,了解自制质控物用于室间质量评价的可行性。结果:①选取抗凝新鲜人血为原料,采用溶血剂提取白细胞后,按照一定的固定条件分别固定红细胞及白细胞,用保养液保存固定处理后的红、白细胞制得全血质控物。②质控物均匀性结果显示,样品内和样品间差异无统计学意义(P＞0.05);20081027、20081111和20090402批号自制质控物及进口质控物三个指标均匀性检测结果的变异系数(CV)变化范围分别为1.51%～1.93%、0.60%～1.13%、0.58%～1.20%、0.74%～1.58%,均小于流式细胞仪说明书规定的荧光分辨率的CV值(CV≤2.00%)。20081027、20081111和20090402批号自制质控物及进口质控物三个指标均匀性的不确定度范围分别为0.189%～0.318%、0.184%～0.280%、0.200%～0.302%、0.209%～0.284%,均小于方法重复性测量的不确定度。③室温放置15天20081027和20081111批号自制质控物三个指标的测定结果与2℃～8℃放置的自制质控物测定结果的比值变化范围分别为93.79%～104.45%、94.03%～103.91%;37℃下放置15天20081027和20081111批号自制质控物三个指标的测定结果与2℃～8℃放置的自制质控物测定结果的比值变化范围分别为32.17%～103.63%、14.20%～100.20%。20081027和20081111批号自制质控物三个指标开盖后不同时间的检测结果与第1天检测结果的绝对偏差范围分别为-0.13%～1.44%、0～2.40%,一元线性回归的方差分析结果显示P值均大于0.05,表明开盖后14天内随着开盖时间的延长检测结果无趋势变化。19周内的长期稳定性评价结果显示自制质控物的三个指标随着保存时间均无线性趋势变化(P＞0.05);20081027和20081111批号自制质控物及进口质控物三个指标长期稳定性的不确定度范围分别为0.470%～1.114%、0.338%～0.798%、0.473%～1.266%,其中仅20081027批号自制质控物CD3~+CD4~+淋巴细胞百分比长期稳定性的不确定度略大于进口质控物,其余指标均小于进口质控物,且均小于方法重复性测量的不确定度。④自制质控物在四种型号流式细胞仪上进行检测,图形显示均可准确设定淋巴细胞群,各阳性细胞群与阴性细胞群分离较好。20081027和20081111批号自制质控物三个指标在Coulter-EPICS XL、BD-FACSCaliber机型仪器间检测结果的最大绝对偏差范围分别为1.88%～3.18%、0.67%～0.99%。20090402批号自制质控物及进口质控物三个指标在Coulter-EPICS XL、Coulter-Cytomics FC500、BD-FACSCaliber、BD-FACSCanto机型仪器间检测结果的最大绝对偏差范围分别为3.84%～10.45%、3.17%～6.99%。⑤20081027和20081111批号自制质控物及进口质控物每次室内质量控制检测结果都在均值±3s范围之内,可认为自制质控物适用于Coulter-EPICS XL机型流式细胞仪进行室内质量控制。⑥室间质量评价调查结果显示,在BD公司仪器组,自制质控物与进口质控物的各指标变异系数(CV)范围分别为:2.94%～8.17%、2.84%～6.89%;在Beckman Coulter公司仪器组,自制质控物与进口质控物的各指标CV范围分别为:3.07%～14.25%、1.84%～5.14%。结论:研制的T淋巴细胞亚群分析全血质控物均匀性良好。室温放置15天对自制质控物的影响较小,而37℃条件下放置时不稳定;开盖后2℃～8℃保存14天的检测结果稳定:2℃～8℃条件下保存19周内稳定。适用于Coulter-EPICSXL、Coulter-Cytomics FC500、BD-FACSCaliber、BD-FACSCanto机型流式细胞仪的检测。可用于Coulter-EPICS XL机型流式细胞仪的室内质量控制。基本满足T淋巴细胞亚群分析室间质量评价的要求。