目的:大量研究表明长期高脂高糖饮食会引起体内脂质和血糖代谢紊乱,严重时引起高脂血症和糖尿病。体内活性氧的增加在以上疾病的发生发展中起重要作用,体内抗氧化酶系统如超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶等由于长期氧化应激的作用水平下降。研究表明氧化应激在糖尿病肾病的发生中起重要作用,而糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症之一。高脂高糖饮食引起的早期代谢综合症的表现虽类似于糖尿病的早期改变,但对肾脏的氧化损伤及机制尚有待于进一步研究。肾素-血管紧张素-醛固酮系统是与肾脏病变直接相关的内分泌系统,其中血管紧张素和醛固酮作用的增加是引起肾脏病变的主要因素。大量研究证实,糖尿病患者肾脏局部血管紧张素Ⅱ活性增高,血管紧张素Ⅱ是肾素-血管紧张素-醛固酮系统的中心,血管紧张素Ⅱ可以诱导细胞氧化应激,还可促进致纤维化因子如纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)及与PAI-1相关的信号转导通路分子(如PI3K/Akt通路的信号分子)引起肾小球硬化,目前已经发现PI3K/Akt通路在多种细胞因子的致纤维化过程中发挥作用。有研究表明多酚类化合物具有肾脏保护作用并可以抑制PAI-1和PI3K的表达。白藜芦醇,一类主要存在于葡萄、藜芦等植物中的多酚类化合物,作为一种天然的抗氧化剂可能改善高热量高脂饮食引起氧化应激。为此,本实验将探讨白藜芦醇对高脂高糖饮食大鼠肾脏的保护作用及其对肾脏中PI3K、PAI-1表达的影响,并进一步了解白藜芦醇可能的抗氧化、抗纤维化作用机制。研究方法:60只雄性Wistar大鼠分为五组:正常对照组(Con)、高脂高糖组(H)、高脂高糖+白藜芦醇剂量组(低、中、高剂量白藜芦醇处理组,R1、R2、R3)。Con组大鼠喂基础饲料,H组及高脂高糖+白藜芦醇剂量组喂高脂高糖饲料,并通过灌胃给予溶解在植物油里的白藜芦醇(50mg/kg.bw, 100mg/kg.bw, 150mg/kg.bw),高脂组灌胃等量植物油,定期称量动物体重。13w后处死所有大鼠,分离血清于-80℃冰箱保存。测定血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),肾组织匀浆液总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。荧光实时定量聚合酶链式反应法检测肾脏PI3K、PAI-1mRNA表达水平,免疫印记法测定PI3K、PAI-1蛋白表达水平。结果:(1)高脂高糖饮食8w时,与Con组相比,H组大鼠体重明显升高,R2、R3组大鼠与H组相比体重降低,13w时各组大鼠体重比较情况与8w类似。(2)与Con组比较,H组大鼠FPG水平显著升高,R2组FPG水平比H组显著降低。与Con组比较,H组大鼠血浆TC、TG水平显著升高,R2组、R3组大鼠血浆TC及R2组TG水平比H组显著降低。(3)H组大鼠肾脏MDA含量比Con组明显升高,与H组相比R1组大鼠肾脏MDA含量降低。而与Con组相比,H组大鼠肾脏T-AOC、T-SOD水平显著降低,白藜芦醇提高T-AOC、T-SOD和GSH-Px水平。(4)与Con组相比H组大鼠肾PAI-1mRNA及PI3K、PAI-1蛋白表达水平升高,白藜芦醇组与H组大鼠相比,其肾脏PI3K、PAI-1mRNA及蛋白表达水平降低。结论:高脂高糖饮食诱导大鼠肾脏处于明显的氧化应激状态,这可能是肾损害发生的原因之一。而白藜芦醇对高脂高糖饮食引起的氧化性肾损伤有保护作用。创新点:我们首先研究了高脂高糖饮食模型大鼠和正常组大鼠肾组织中PI3K、PAI-1的表达差异,并提出了白藜芦醇通过调节大鼠肾脏PI3K、PAI-1表达来发挥的抗纤维化作用及其调控机制。鉴于氧化应激在肾损伤发展中的重要作用以及白藜芦醇的抗氧化、抗纤维化意义,为揭示肾损伤的发病机制,为探讨白藜芦醇预防改善肾损伤机理研究开辟了一个新思路,具有积极的理论和现实意义,相关研究国内外未见报道。