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小麦的烘烤品质不仅与贮藏蛋白的含量有关，而且还与其组成有关。烘烤品质的测定通常需要比较昂贵的仪器，如：粉质仪、拉伸仪、和面仪等，这些仪器难以在各育种单位普及。另外，利用上述仪器进行分析时，需要较大的样品量，这在育种的早代难以实现。虽然沉淀值、凯氏定N等方法较为经济，但其效率却较低。最近，酶联免疫吸附测定法(ELISA)，因具有成本低、耗费少、所需样品量少以及样品处理简单等优点，已开始用于品质预测和筛选。利用这种方法测定小麦品质，关键是要制各适宜的抗体，尤其是单克隆抗体。研究表明，HMW-GS 1Bx13和1By16是对烘烤品质影响较大的优质亚基，因此，制备这两个亚基的单克隆抗体更有应用价值。而且，由于这两个亚基的基因还未克隆，以1Bx13和1By16亚基为抗原制备单克隆抗体还可以用于筛选cDNA表达文库，从而克隆这两个亚基及其它贮藏蛋白基因。 本研究以斯卑尔脱小麦Somiedo为材料，分别采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)、双向A-PAGE×SDS-PAGE、等电聚焦×SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(IEF×SDS-PAGE)、高效毛细管电泳(HPCE)、高效液相色谱(HPLC)以及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)等方法对高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)进行分离鉴定。采用电泳法分离纯化1Bx13和1By16亚基，并以这两个亚基为抗原免疫BALB/C小鼠，采用杂交瘤技术制备相应抗原的单克隆抗体，并采用间接ELISA方法结合SPSS软件分析，研究所制备单克隆抗体在预测小麦烘烤品质及亚基鉴定方面的应用。另外，还进行了HMW-GS及LMW-GS抗原表位分析。主要研究结果如下： 1．HMW-GS的分离鉴定 目前用于HMW-GS分离鉴定的方法较多，其中，以PAGE方法最为经济。双向电泳(2-DE)的分辨率最高，且可对蛋白质的等电点进行研究。HPLC不仅可用于分离鉴定，还可回收纯化单个亚基，但所需流动相量大，仪器比较昂贵，分析成本较高。HPCE相对于HPLC来说较为经济，与PAGE相比可以避免有毒药品的使用，因此是一种比较理想的分离鉴定HMW-GS的方法。本研究中的斯卑尔脱小麦Somiedo含有五个HMW-GS(1，13+16，2+12)，均能利用上述方法进行分离鉴定。2-DE分析结果表明，从等电点来看，该品种所含有的HMW-GS主要分布在碱性区域，而且1Bx13和1By16较其它三条亚基的